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食品安全快速檢測箱 食品微生物采樣箱 水質微生物采樣箱 恒溫培養箱 |
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產品名稱: |
食品安全快速檢測箱 食品微生物采樣箱 水質微生物采樣箱 恒溫培養箱 |
產品型號: |
食品安全快速檢測箱 食品微生物采樣箱 水質微生物采樣箱 恒溫培養箱 |
產品產地: |
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產品特點: |
上海華巖儀器設備有限公司供應食品安全快速檢測箱 食品微生物采樣箱 水質微生物采樣箱 恒溫培養箱 |
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食品安全快速檢測箱 食品微生物采樣箱 水質微生物采樣箱 恒溫培養箱 詳細信息 |
上海華巖儀器設備有限公司供應食品安全快速檢測箱 食品微生物采樣箱 水質微生物采樣箱 恒溫培養箱
00002食品微生物采樣箱 產品用途: 食品中微生物快速檢測
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DA101食品安全快速檢測箱I 產品用途: 食品安全多項目檢測
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DA102食品安全快速檢測箱II 產品用途: 食品安全多項檢測
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DA103食品安全快速檢測箱III 產品用途: 食品安全多項檢測
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00001水質微生物采樣箱 產品用途: 水質中微生物快速檢測
水質微生物采樣檢測箱 |
序號 |
產品名稱 |
規 格 |
適用范圍 |
1 |
菌落總數測試片 |
24片/包 |
各類食品,桶裝飲用水,調味品,奶制品,蛋制品;也可用于與食品接觸的容器操作臺和其他設備表面現象的衛生檢測 |
2 |
飲用水大腸菌群檢驗紙片(5管法) |
1份/包 |
生活飲用水、純凈水、礦泉水 |
3 |
水質大腸菌群檢驗紙片 (15管法) |
1份/包 |
水源水、生活飲用水、純凈水 |
4 |
水質總大腸菌群檢測試劑盒 |
10份/盒 |
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5 |
大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群檢驗紙片 |
24片/包 |
適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢驗 |
6 |
沙門氏菌測試片 |
24片/包 |
奶制品,乳制品,鮮、凍禽產品,肉和肉產品,蛋和蛋制品,冷凍飲品、飲料,飲用水,調味品,冷食菜,豆制品,糕點,糖果,蜜餞,各種發酵酒,食用螺旋藻粉,即食動物性水產干制品,即食藻類食品,腌、醉制生食動物性水產品 |
7 |
金黃色葡萄球菌測試片 |
24片/包 |
糕點類,糖果,蜜餞,奶制品,乳制品,豆制品,飲料及冷飲,各種發酵酒,各類生、熟食畜禽肉及肉制品,涼拌食品,蛋及蛋制品,魚及水產品,調味品,干制食品,食用螺旋藻粉 |
8 |
大腸桿菌O157測試片 |
24片/包 |
海產品、水產品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品 |
9 |
副溶血弧菌測試片 |
24片/包 |
即食動物性水產干制品,即食藻類食品,腌、醉制生食動物性水產品及其糜制品和熟制品,水產調味品 |
10 |
阪崎腸桿菌測試片 |
24片/包 |
奶粉、牛奶及奶制品 |
11 |
蠟樣芽胞桿菌測試片 |
24片/包 |
乳制品、肉類、炒米飯、魚、土豆、淀粉類食品、各種甜點、 涼拌蔬菜、水果、色拉 |
12 |
六種致病菌和大腸菌檢測試劑盒 |
1份/盒 |
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13 |
便攜式培養箱 |
選配 |
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14 |
說明書 |
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附箱配件:微型電子天平、紫外線消毒燈、可調式移液器、移液頭、防泄漏金屬酒精燈、酒精瓶、酒精瓶、消毒棉球、無菌樣品袋、無菌注射器、木制滅菌采樣板、采樣勺、采樣鑷、多功能剪刀、長柄大號棉簽、一次性手套、試管架、帶蓋試管、一次性吸管、標簽紙、記號筆、儲物盒。 |
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水質微生物檢測系列產品 使用說明書
目錄 (點擊文字進入相應使用說明)
一、 適用范圍 二、 實驗前的準備工作及操作中的注意事項 三、 生活飲用水微生物常規指標及限值 四、 檢測流程圖 五、 菌落總數測試片使用說明 六、 飲用水大腸菌群檢驗紙片使用說明 七、 水質大腸菌群檢驗紙片使用說明 八、 總大腸菌群檢測試劑盒使用說明 九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明 十、 沙門氏菌測試片使用說明 十一、金黃色葡萄球菌測試片使用說明 十二、副溶血弧菌測試片使用說明 十三、大腸桿菌O157測試片使用說明 十四、阪崎腸桿菌測試片使用說明 十五、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明 十六、致病菌增菌檢測試劑盒使用說明
一、適用范圍
適用于生活飲用水及其水源水中衛生指標菌與致病菌的日常監測以及應急檢測需要。
二、實驗前的準備工作及操作中的注意事項
1、開展微生物快速檢測所需的基本條件 1.1、 一間通風良好、面積不需要很大的獨立房間,房間里最好備有紫外線消毒燈,洗手盆,實驗臺。應急檢測時,臨時性的房間應注意工作環境的的消毒(如采用84消毒液消毒等),并備好酒精燈。 1.2、 一臺高壓鍋或紅外線消毒柜(家用消毒碗柜也可。)應急檢測時,應備好消毒液,含氯消毒液的濃度在250ppm時,器皿消毒應保持5分鐘以上。 1.3、 一臺小型恒溫培養箱; 1.4 、有條件時,配備一臺普通冰箱,用于存放樣品; 1.5 、水質微生物采樣檢測箱,箱內備有采樣用具與實驗用的一些工具和器皿; 1.6 、檢測用試紙與試劑盒。 1.7、 保存條件:所有微生物測試片產品均需存放在4~10℃冰箱中,保質期為一年,鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水,最好在拆封前將整包回溫至室溫。
2、移液器的消毒 移液器頭的消毒:將管頭放入錫箔袋或用錫箔紙包好,放入民用紅外線消毒柜中消毒;或將管頭放入消毒液中浸泡,取用時注意甩干消毒液并用無菌生理鹽水沖洗三次。
3、無菌操作和注意事項 3.1、點燃酒精燈,營造局部無菌環境。取樣和加樣時盡量靠近酒精燈操作。能用火焰消毒的操作工具如鑷子、剪子、長柄勺、小刀等應在酒精燈上消毒后使用。 3.2、用75%酒精棉球將手抹擦消毒。 3.3、廢棄物及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。
三、生活飲用水微生物常規指標及限值
根據國家生活飲用水衛生標準(GB 5749—2006),常規的微生物指標及限值如下:
指 標 |
限 值 |
菌落總數(CFU/mL) |
100 |
總大腸菌群(MPN/100mL或CFU/100mL) |
不得檢出 |
耐熱大腸菌群(MPN/100mL或CFU/100mL) |
不得檢出 |
大腸埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL) |
不得檢出 |
MPN表示最可能數;CFU表示菌落形成單位。當水樣檢出總大腸菌群時,應進一步檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;水樣未檢出總大腸菌群,不必檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群。 |
四、檢測流程圖
|
五、菌落總數測試片使用說明 1、原理及適用范圍 菌落總數是指樣品經過處理,在一定條件下培養后所得1mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數,是最常用的微生物檢測項目。 菌落總數測試片(FilmplateTM Aerobic count plate BB202)是一種預先制備好的一次性培養基產品,含有標準的營養培養基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在測試片上呈紅色,這樣可縮短計數時間和增強計數效果。 本產品適合于各類食品及食品原料中菌落總數的測定,也可用于檢測食品加工容器、操作臺和其他設備表面的菌落總數。 執行標準:食品衛生微生物學檢驗菌落總數測定——PetrifilmTM測試片法(GB/T 4789.2-2008 )。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,必要時用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調節樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進行檢測。將菌落總數測試片(BB202)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。一般食品培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h;水產品培養溫度為30℃±1℃,培養48h。 3、結果判讀 細菌在測試片上生長后會顯示紅色斑點,選擇菌落數適中(30~300個)的測試片進行計數,乘以稀釋倍數后即為每毫升(克)樣品中所含的細菌菌落總數。
4、計數原則及報告方式 4.1、若只有一個稀釋度紙片上的菌落數在適宜計數范圍內,計算兩個紙片菌落數的平均值,再將平均值乘以相應稀釋倍數,作為每毫升(或克)樣品中菌落總數結果。 4.2、若有兩個連續稀釋度的紙片菌落數在適宜計數范圍內時,按式(1)計算: 式中: N——樣品中菌落數; ∑C——測試片上(含適宜范圍菌落數的測試片)菌落數之和; n1——第一個適宜稀釋度測試片數; n2——第二個適宜稀釋度測試片數; d——稀釋因子(第一稀釋度)。 示例:
稀釋度 |
1:100(第一稀釋度) |
1:1000(第二稀釋度) |
菌落數 |
232,244 |
33,35 |
上述數據經“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。 4.3、若所有的稀釋度菌落總數均大于300,則對稀釋度最高的測試片進行計數,其他測試片可記錄為多不可計,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。 4.4、若所有的稀釋度菌落總數均小于30,則應按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。 4.5、若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無菌落生長,則以小于1乘以最低稀釋倍數計算。 4.6、若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~300之間,其中一部分小于30或大于300,則以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。 4.7、菌落總數的報告 4.7.1、菌落總數在100以內時,按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數字報告。 4.7.2、大于或等于100時,第三位數字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數字,后面的0代替位數,也可用10的指數形式來表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數字。 4.7.3、若測試片上一片紅色無法計數時,則報告多不可計。 4.7.4、若空白對照上有菌落生長,則此次檢測結果無效。 4.7.5、稱重取樣以CFU/g為單位報告,體積取樣以CFU/mL為單位報告。 5、表面取樣方法 加1mL滅菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)在測試片上,至少靜置5min,使培養基凝固;提起上層膜,使中央濾紙部分貼到待測物表面,用手在外側輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養箱內培養。 6、附加說明 6.1、菌落總數測試片檢測結果與傳統平板計數瓊脂平板法符合率可達80%以上,山東省疾病預防控制中心進行的驗證試驗表明,24h計數測試片上菌落數為平板菌落數的87%。 6.2、磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500mL蒸餾水中,用大約175mL的1mol/L氫氧化鈉溶液調節pH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15分鐘,或者放入消毒碗柜中消毒。 6.3、生理鹽水的配制與滅菌:取8.5g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000mL蒸餾水或純凈水中,先煮開后進行分裝,取9mL加入到10mL潔凈試管中,蓋上硅橡膠塞或棉紗塞,放入紅外線消毒柜中消毒。
六、飲用水大腸菌群檢驗紙片使用說明(五管法) 1、適用范圍 本產品適用于出廠成品水或直接飲用的礦泉水和純凈水中總大腸菌群的快速檢驗。 2、方法原理 將乳糖、顯色劑和選擇性培養基加載在紙片上,經培養后能夠在紙片上生長并發酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性,記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。 執行標準:生活飲用水衛生標準(GB 5749—2006)。 3、操作方法 3.1、用滅菌吸管吸取10mL水樣加入裝有大紙片的塑料薄膜袋中,均勻涂布,共做5個重復; 3.2、將接種好的紙片放于培養箱中,培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h觀察結果。 4、結果判讀 4.1、若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點為大腸菌群陽性,紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景上呈現紅色斑點但周圍沒有黃暈均為大腸菌群陰性。 4.2、根據每個稀釋度的陽性反應紙片數,查MPN表可得出水樣中總大腸菌群的MPN值(見表1)。如所有紙片均為陰性時,可報告總大腸菌群未檢出。 4.3、對于陽性紙片,應進一步檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群。用接種環在陽性菌斑處沾取少許帶菌濾紙,用3mL滅菌生理鹽水混勻,接種到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上,進行44.5℃培養和檢驗。
表1 用5份 10mL水樣時各種陽性和陰性結果 組合時的最可能數(MPN)及95%可信限
陽性紙片數 |
最可能數(MPN/100mL) |
95%可信限 |
下限 |
上限 |
0 |
0 |
0 |
6.0 |
1 |
2.2 |
0.1 |
12.6 |
2 |
5.1 |
0.5 |
19.2 |
3 |
9.2 |
1.6 |
29.4 |
4 |
16.0 |
3.3 |
52.9 |
5 |
>16 |
8.0 |
無限 |
七、水質大腸菌群檢驗紙片使用說明(十五管法)
1、適用范圍 適用于水源水、生活飲用水和其他水樣中大腸菌群的快速計數。 2、方法原理 將乳糖膽鹽選擇性培養基和TTC顯色劑加載在紙片上,經培養后能夠在紙片上生長并發酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性,記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數,根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。 執行標準:生活飲用水衛生標準(GB/T 5749—2006);生活飲用水標準檢驗方法(GB/T 5750.12-2006)。 3、方法特點 與國標法中的十五管法相對應,將原來幾步的試驗簡化為一步,時間由78h縮短為24h以內,省去了制備培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。 4、操作方法 4.1、接種:用滅菌吸管吸取10mL水樣插入裝有大紙片的塑料薄膜袋中,均勻涂布,共做5個重復;分別取1mL水樣加到小紙片中,共接5個重復;另取1mL水樣加到9mL滅菌生理鹽水中混勻,用1mL滅菌吸管分別吸取1mL(即0.1mL水樣),加到最后5片小紙片中。 4.2、培養:將接種好的紙片放于培養箱中,36℃±1℃培養15~24h。 5、結果判讀 觀察每片顏色變化,若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點為大腸菌群陽性,若紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景上呈現紅色斑點,但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性。
6、結果報告 根據陽性反應紙片數,查MPN表可得出水樣中大腸菌群的MPN值。如水樣污染嚴重含菌量較多,可將水樣稀釋成10-1和10-2再加到紙片上,即實際水樣加量為1mL、0.1mL、0.01mL水樣,其實際MPN值乘以10,以此類推。 6.1、列舉說明 假設檢驗15張紙片陽性數分別為5-3-1,那么查水質大腸菌群MPN檢索表可知,大腸菌群的MPN值為每100mL水樣中110,如果接種量為1mL、0.1mL、0.01mL時,MPN值為1100。
八、總大腸菌群檢測試劑盒使用說明 1、適用范圍 適用于二次供水、自來水、水源水、生活飲用水、礦泉水等樣品中總大腸菌群檢測。對污染較嚴重的樣品采用十五管法,其它可采用五管檢測法。 2、方法原理 與國標法相同。事先將乳糖蛋白胨培養基雙料、乳糖蛋白胨培養基單料濃縮至試劑盒培養孔中,隨時取用。 3、操作方法 3.1、十五管法:用無菌吸管吸取5個10mL水樣分別加入到試劑盒1號~5號5個大發酵培養基孔內。吸取5個1mL水樣分別加入到試劑盒7號~11號5個小發酵培養基孔內。吸取5個用滅菌生理鹽水稀釋后的1:10稀釋液1mL加入到試劑盒12號~16號小發酵培養基孔內。余孔可做對照。 3.2、五管法: 用無菌吸管吸取5個10mL水樣分別加入到試劑盒1號~5號5個大發酵培養基管(孔)內。余孔可做對照。 3.3、排氣泡: 加樣后集氣窗內如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時可輕輕用力在桌面上敲擊數次排出氣泡。 3.4、培養:將加樣后的試劑盒置36℃± 1℃溫箱中,培養18h~24h。 3.5、觀察結果:樣液變為黃色為產酸、集氣窗中有氣泡為產氣,產酸產氣者為陽性結果,可根據試劑盒的陽性管數,參照國標GB/T5750.12-2006的方法,查表 MPN檢索表(表2或 表3),報告每100mL水樣中的總大腸菌群最可能數。如需對陽性結果進一步證實,可參考GB/T5750.12-2006方法進行。如所有管數均為陰性時,可報告總大腸菌群未檢出。
4、 注意事項 4.1、加入樣品后不需搖勻,平拿平放。 4.2、加樣時可用一次性無菌塑料吸管,將樣品稀釋液加至試劑盒所標刻度處。 4.3、在培養箱中取試劑盒時應平托出來,不要傾斜以免由于試劑盒的傾斜將陽性管集氣窗中的氣泡排出而影響結果。 4.4、試劑盒為一次性無菌用品,供一次性使用。
表3 十五管法總大腸菌群(MPN)檢索表 (總接種量55.5 mL,其中5份10 mL水樣,5份1mL水樣,5份0.1 mL水樣)
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
0 0 0 0 0 0 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
<2 2 4 5 7 9 |
1 1 1 1 1 1 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
2 4 6 8 10 12 |
0 0 0 0 0 0 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
2 4 6 7 9 11 |
1 1 1 1 1 1 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
4 6 8 10 12 14 |
0 0 0 0 0 0 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
4 6 7 9 11 13 |
1 1 1 1 1 1 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
6 8 10 12 15 17 |
0 0 0 0 0 0 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
6 7 9 11 13 15 |
1 1 1 1 1 1 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
8 10 12 15 17 19 |
0 0 0 0 0 0 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
8 9 11 13 15 17 |
1 1 1 1 1 1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
11 13 15 17 19 22 |
0 0 0 0 0 0 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
9 11 13 15 17 19 |
1 1 1 1 1 1 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
13 15 17 19 22 24 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
2 2 2 2 2 2 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
5 7 9 12 14 16 |
3 3 3 3 3 3 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
8 11 13 16 20 23 |
2 2 2 2 2 2 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
7 9 12 14 17 19 |
3 3 3 3 3 3 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
11 14 17 20 23 27 |
2 2 2 2 2 2 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
9 12 14 17 19 22 |
3 3 3 3 3 3 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
14 17 20 24 27 31 |
2 2 2 2 2 2 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
12 14 17 20 22 25 |
3 3 3 3 3 3 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 24 28 32 36 |
2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明 1、原理及適用范圍 根據國家生活飲用水衛生標準,當水樣檢出總大腸菌群時,應進一步檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒有必要進行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗。 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運用酶底物技術,含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經過44.5℃培養后,大腸埃希氏菌顯藍色,紫紅色或藍色菌斑都屬耐熱大腸菌群。 執行標準:生活飲用水衛生標準(GB 5749—2006)。 本產品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測。 2、操作方法 2.1、對于大腸菌群檢驗顯示陽性的紙片或產酸產氣的發酵管,用接種環挑取菌液,轉入2~3mL無菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養基凝固。 2.2、將接種好的測試片疊在一起放回到原來的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養箱中,堆疊片數不得超過12片,44.5℃培養15~24h觀察結果。 3、結果判讀 測試片上出現紫紅色或藍色菌斑都是耐熱大腸菌群陽性,其中藍色為大腸埃希氏菌陽性。沒有紫紅色或藍色斑點為陰性結果。
4、附加說明 耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長和發酵乳糖的菌群被稱為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準確和專一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門氏菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍 沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒、導致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細菌。能引起食物傳播性疾病,近年來,已經成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源于奶制品、禽產品和肉產品;雞肉和雞蛋尤其是高風險食品。沙門氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現問題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時服用抗生素類藥品,沙門氏菌感染將導致生命危險。 沙門氏菌測試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否帶有沙門氏菌,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。 本產品適用于肉和肉產品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將沙門氏菌測試片(BS205)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個樣品接種兩片。同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍色的菌落為其他菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。 4、結果報告 在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。 5、附加說明 5.1、有關驗證試驗表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍色,葡萄球菌不生長。 5.2、測試片具有較強的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時仍可計算出菌落。臨床實際應用結果顯示陽性檢出率高于分離培養法1.84‰,復查準確率提高約13.0%(中國衛生檢驗雜志2006,16(8):954-955)。 5.3、陽性確認試驗推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測試片上可疑的沙門氏菌菌落,在對應上蓋膜上做好標記并編號。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報告25g樣品沙門氏菌陽性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽性,報告25g被檢樣品沙門氏菌陰性。 5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一,其侵襲力很強,能產生多種致病物質如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛生問題,我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。 金黃色葡萄球菌測試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養基和專一性的酶顯色劑,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序。 本產品適用于各類生、熟食制品,飲料,糕點類,調味品,奶制品等的快速檢測。 執行標準:食品衛生微生物學檢驗金黃色葡萄球菌計數——PetrifilmTM 測試片法(GB/T 4789.37—2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,調節樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,將金黃色葡萄球菌測試片(BT206)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 培養后,測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。 4、計數原則及報告方式 通常選擇菌落數在15~150之間的稀釋度,兩張測試片菌落平均數乘以稀釋倍數,即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數,以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細可參考大腸桿菌大腸菌群測試片(BE203)的計數原則。 5、附加說明 5.1、本產品對于提高衛生行政監督部門應對細菌性食物中毒等突發性公共衛生事件的能力,具有重要的作用。 5.2、山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明,當金黃色葡萄球菌在0~9個菌落范圍內時,測試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標準要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。 5.3、經試驗,該測試片的檢測靈敏度高,特異性強,重復性好。對純菌的檢測下限可達3cfu/mL,與營養瓊脂計數、Baird-Parker培養計數和顯色培養基計數比較,檢測結果均無顯著差異。(食品研究與開發2009,30(1):94-97) 5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十二、副溶血弧菌測試片使用說明 1、原理及適用范圍 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌,海產品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據國家食源性疾病監測網統計,我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢,已成為我國一個嚴重的食源性公共衛生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續1~2天。 副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養基產品,含有高選擇性培養基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,更加適合衛生監督檢驗部門和食品生產加工企業使用。 本產品適用于水產品、海產品及其腌、熟制品、水產調味品等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固。每個樣品接種兩片,同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數非目的菌在測試片上不生長,少數能生長,如創傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍色,明顯區別于目的菌。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式 在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。 5、附加說明 5.1、根據出入境檢驗檢疫局技術中心所做的對比試驗結果表明,副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性,對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL,與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準(SN)方法符合率達到90%以上(中國衛生檢驗雜志2008,18(12):2621-2623)。 5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十三、大腸桿菌O157測試片使用說明 1、原理及適用范圍 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的并發癥。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十余個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。 大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程序,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。 本品適用于海產品、水產品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將大腸桿菌O157測試片(BO204)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3 、結果判讀 對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式 報告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。 5、附加說明 5.1、本品所用培養基已在國外得到比較廣泛的應用,有關驗證試驗表明,接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑,準確率達到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。 5.2、經本公司檢測,大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為1 cfu/mL。 5.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十四、阪崎腸桿菌測試片使用說明 1、原理及適用范圍 阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴重的神經系統后遺癥、發育障礙等癥狀,引起的死亡率高達50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關,奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導致感染的發生。 阪崎腸桿菌測試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預先制備好的一次性培養基產品,由阪崎腸桿菌選擇性培養基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡化了檢測程序,更加適合各級檢驗部門和食品生產企業使用。本產品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測。 參照標準:食品衛生微生物檢驗阪崎腸桿菌檢驗(GB/T4789.40-2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預熱至44℃裝有900mL專用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地搖動至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養6-8h。 2.2、接種:將阪崎腸桿菌測試片(BQ208)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL經過增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養基凝固,每個樣品接種兩片。做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽性結果;無任何點為陰性結果。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、結果報告 在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。 5、附加說明 5.1 、經過試驗,測試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時,一加樣下去就會出現有紫色的點或暈狀,此為產品本身顯色劑的原因,不影響產品的使用和結果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。 5.2 、多次試驗結果阪崎腸桿菌測試片對純菌的最低檢測限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。 5.3 、專用增菌液的配制和滅菌:取一包專用增菌培養基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當天使用。有條件可采用高壓滅菌。 5.4 、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍 蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當,放置時間過長,使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產生的熱穩定毒素,而導致食物中毒的發生。中毒的發病率較高,一般為60%~100%。 蠟樣芽孢桿菌測試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養基產品,由選擇性培養基、高分子吸水凝膠和專一性酶指示劑等構成,一步培養顯色就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,對于提高細菌性食物中毒突發事件的反應能力具有重要的作用,同時也可在食品生產企業使用。 本產品適用于乳制品、肉類、淀粉類食品、各種甜點等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液。 2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測試片(BL210)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管每個梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對于出現陽性菌落的樣品,最好用其他方法作進一步的鑒定。
4、附加說明 4.1、本產品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,而大部分非目標菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。 4.2、初步試驗表明,蠟樣芽孢桿菌測試片對純菌的最低檢測限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測試片檢測了23種食品樣品,同時接種平皿做對比試驗。測試片檢出陽性樣品7個,檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽性樣品6個,檢出率為26.1%,測試片法比平皿法高了4.3%。 4.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。
十六、致病菌增菌檢測試劑盒使用說明
1、適用范圍 本品適用于食品及水中致病性沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測的前期增菌實驗觀察以及大腸菌群污染程度的檢測。 2、方法原理 依據國標GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術將相對應培養基包被在試劑盒底部,隨時取用。 3、樣品稀釋 同國標法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。 4、致病菌檢測 4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標號為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內。加樣后的1、2、3號分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。 4.2、 培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養6~18小時。 4.3 、觀察結果:如果某致病菌的增菌液發生渾濁,即預示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國標法進一步檢測。 5 、大腸菌檢測 5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗臺面上,打開盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標號為4、5、6的小培養基孔內。另用滅菌吸管分別吸取3個1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標號為7、8、9的小培養基孔內,標號為10的小培養基孔內可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養基陰性對照孔使用。 5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時可輕輕用力在桌面上敲擊數下排出氣泡。 5.3 、培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養18~24小時。 5.4 、觀察結果:樣液變為黃色為產酸、集氣窗中有氣泡為產氣,產酸產氣者為陽性結果,陽性結果的孔數越多,說明污染越嚴重。
6、注意事項 6.1、致病菌檢測與大腸菌檢測可同時進行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測培養前一定要排氣泡,在培養箱中取試劑盒時注意平托出來,避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽性集氣窗中的氣泡流失而影響結果判斷。 6.2、試劑盒為一次性無菌包裝用品,供一次性即開即用,。 7、保存條件和有效期 避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個月。 |
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2 2 2 2 2 2 |
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14 17 20 24 27 31 |
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17 21 24 28 32 36 |
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15 17 20 23 25 28 |
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5 5 5 5 5 5 |
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17 20 23 26 29 32 |
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0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
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13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明 1、原理及適用范圍 根據國家生活飲用水衛生標準,當水樣檢出總大腸菌群時,應進一步檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒有必要進行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗。 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運用酶底物技術,含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經過44.5℃培養后,大腸埃希氏菌顯藍色,紫紅色或藍色菌斑都屬耐熱大腸菌群。 執行標準:生活飲用水衛生標準(GB 5749—2006)。 本產品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測。 2、操作方法 2.1、對于大腸菌群檢驗顯示陽性的紙片或產酸產氣的發酵管,用接種環挑取菌液,轉入2~3mL無菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養基凝固。 2.2、將接種好的測試片疊在一起放回到原來的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養箱中,堆疊片數不得超過12片,44.5℃培養15~24h觀察結果。 3、結果判讀 測試片上出現紫紅色或藍色菌斑都是耐熱大腸菌群陽性,其中藍色為大腸埃希氏菌陽性。沒有紫紅色或藍色斑點為陰性結果。
4、附加說明 耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長和發酵乳糖的菌群被稱為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準確和專一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門氏菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍 沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒、導致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細菌。能引起食物傳播性疾病,近年來,已經成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源于奶制品、禽產品和肉產品;雞肉和雞蛋尤其是高風險食品。沙門氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現問題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時服用抗生素類藥品,沙門氏菌感染將導致生命危險。 沙門氏菌測試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否帶有沙門氏菌,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。 本產品適用于肉和肉產品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將沙門氏菌測試片(BS205)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個樣品接種兩片。同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍色的菌落為其他菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。 4、結果報告 在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。 5、附加說明 5.1、有關驗證試驗表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍色,葡萄球菌不生長。 5.2、測試片具有較強的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時仍可計算出菌落。臨床實際應用結果顯示陽性檢出率高于分離培養法1.84‰,復查準確率提高約13.0%(中國衛生檢驗雜志2006,16(8):954-955)。 5.3、陽性確認試驗推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測試片上可疑的沙門氏菌菌落,在對應上蓋膜上做好標記并編號。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報告25g樣品沙門氏菌陽性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽性,報告25g被檢樣品沙門氏菌陰性。 5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一,其侵襲力很強,能產生多種致病物質如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛生問題,我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。 金黃色葡萄球菌測試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養基和專一性的酶顯色劑,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序。 本產品適用于各類生、熟食制品,飲料,糕點類,調味品,奶制品等的快速檢測。 執行標準:食品衛生微生物學檢驗金黃色葡萄球菌計數——PetrifilmTM 測試片法(GB/T 4789.37—2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,調節樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,將金黃色葡萄球菌測試片(BT206)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 培養后,測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。 4、計數原則及報告方式 通常選擇菌落數在15~150之間的稀釋度,兩張測試片菌落平均數乘以稀釋倍數,即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數,以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細可參考大腸桿菌大腸菌群測試片(BE203)的計數原則。 5、附加說明 5.1、本產品對于提高衛生行政監督部門應對細菌性食物中毒等突發性公共衛生事件的能力,具有重要的作用。 5.2、山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明,當金黃色葡萄球菌在0~9個菌落范圍內時,測試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標準要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。 5.3、經試驗,該測試片的檢測靈敏度高,特異性強,重復性好。對純菌的檢測下限可達3cfu/mL,與營養瓊脂計數、Baird-Parker培養計數和顯色培養基計數比較,檢測結果均無顯著差異。(食品研究與開發2009,30(1):94-97) 5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十二、副溶血弧菌測試片使用說明 1、原理及適用范圍 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌,海產品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據國家食源性疾病監測網統計,我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢,已成為我國一個嚴重的食源性公共衛生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續1~2天。 副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養基產品,含有高選擇性培養基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,更加適合衛生監督檢驗部門和食品生產加工企業使用。 本產品適用于水產品、海產品及其腌、熟制品、水產調味品等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固。每個樣品接種兩片,同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數非目的菌在測試片上不生長,少數能生長,如創傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍色,明顯區別于目的菌。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式 在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。 5、附加說明 5.1、根據出入境檢驗檢疫局技術中心所做的對比試驗結果表明,副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性,對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL,與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準(SN)方法符合率達到90%以上(中國衛生檢驗雜志2008,18(12):2621-2623)。 5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十三、大腸桿菌O157測試片使用說明 1、原理及適用范圍 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的并發癥。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十余個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。 大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程序,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。 本品適用于海產品、水產品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將大腸桿菌O157測試片(BO204)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3 、結果判讀 對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式 報告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。 5、附加說明 5.1、本品所用培養基已在國外得到比較廣泛的應用,有關驗證試驗表明,接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑,準確率達到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。 5.2、經本公司檢測,大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為1 cfu/mL。 5.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十四、阪崎腸桿菌測試片使用說明 1、原理及適用范圍 阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴重的神經系統后遺癥、發育障礙等癥狀,引起的死亡率高達50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關,奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導致感染的發生。 阪崎腸桿菌測試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預先制備好的一次性培養基產品,由阪崎腸桿菌選擇性培養基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡化了檢測程序,更加適合各級檢驗部門和食品生產企業使用。本產品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測。 參照標準:食品衛生微生物檢驗阪崎腸桿菌檢驗(GB/T4789.40-2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預熱至44℃裝有900mL專用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地搖動至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養6-8h。 2.2、接種:將阪崎腸桿菌測試片(BQ208)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL經過增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養基凝固,每個樣品接種兩片。做一片空白陰性對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽性結果;無任何點為陰性結果。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、結果報告 在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。 5、附加說明 5.1 、經過試驗,測試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時,一加樣下去就會出現有紫色的點或暈狀,此為產品本身顯色劑的原因,不影響產品的使用和結果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。 5.2 、多次試驗結果阪崎腸桿菌測試片對純菌的最低檢測限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。 5.3 、專用增菌液的配制和滅菌:取一包專用增菌培養基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當天使用。有條件可采用高壓滅菌。 5.4 、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍 蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當,放置時間過長,使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產生的熱穩定毒素,而導致食物中毒的發生。中毒的發病率較高,一般為60%~100%。 蠟樣芽孢桿菌測試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養基產品,由選擇性培養基、高分子吸水凝膠和專一性酶指示劑等構成,一步培養顯色就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,對于提高細菌性食物中毒突發事件的反應能力具有重要的作用,同時也可在食品生產企業使用。 本產品適用于乳制品、肉類、淀粉類食品、各種甜點等的快速檢測。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液。 2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測試片(BL210)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管每個梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白對照。 2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。 3、結果判讀 對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對于出現陽性菌落的樣品,最好用其他方法作進一步的鑒定。
4、附加說明 4.1、本產品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,而大部分非目標菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。 4.2、初步試驗表明,蠟樣芽孢桿菌測試片對純菌的最低檢測限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測試片檢測了23種食品樣品,同時接種平皿做對比試驗。測試片檢出陽性樣品7個,檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽性樣品6個,檢出率為26.1%,測試片法比平皿法高了4.3%。 4.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。
十六、致病菌增菌檢測試劑盒使用說明
1、適用范圍 本品適用于食品及水中致病性沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測的前期增菌實驗觀察以及大腸菌群污染程度的檢測。 2、方法原理 依據國標GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術將相對應培養基包被在試劑盒底部,隨時取用。 3、樣品稀釋 同國標法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。 4、致病菌檢測 4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標號為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內。加樣后的1、2、3號分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。 4.2、 培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養6~18小時。 4.3 、觀察結果:如果某致病菌的增菌液發生渾濁,即預示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國標法進一步檢測。 5 、大腸菌檢測 5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗臺面上,打開盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標號為4、5、6的小培養基孔內。另用滅菌吸管分別吸取3個1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標號為7、8、9的小培養基孔內,標號為10的小培養基孔內可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養基陰性對照孔使用。 5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時可輕輕用力在桌面上敲擊數下排出氣泡。 5.3 、培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養18~24小時。 5.4 、觀察結果:樣液變為黃色為產酸、集氣窗中有氣泡為產氣,產酸產氣者為陽性結果,陽性結果的孔數越多,說明污染越嚴重。
6、注意事項 6.1、致病菌檢測與大腸菌檢測可同時進行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測培養前一定要排氣泡,在培養箱中取試劑盒時注意平托出來,避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽性集氣窗中的氣泡流失而影響結果判斷。 6.2、試劑盒為一次性無菌包裝用品,供一次性即開即用,。 7、保存條件和有效期 避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個月。 |
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便攜式恒溫培養箱 產品用途: 微生物、真菌毒素檢測時的恒溫培養使用 產品說明 一、適用范圍 微生物、真菌毒素檢測時的恒溫培養使用。 二、儀器特點 小巧、耐用、便于攜帶。即可在實驗室使用,又可采用車載電源轉換器在車中使用。 三、主要技術參數 工作室尺寸(mm):200×250×200 外形尺寸(mm):350×340×260 控溫范圍(℃):外界~45 電源電壓(V):220 功率(W):50 溫度波動(℃):±1
四、使用方法 1、將需培養的物品放入箱內,關好箱門。 2、接通電源,打開電源開關,指示燈亮,表示工作正常,儀表顯示工作室溫度,然后將按碼開關按到所需溫度(如37.0℃),綠燈亮表示通電升溫,紅燈亮表示斷電保溫,紅綠燈交替變化表示進入恒溫狀態,當儀器恒溫30min后,儀表顯示溫度和設定基本一致。并可通過按碼進行適當調節。 五、注意事項 1、工作室內物品擺放切勿過擠,以便于熱量循環,使物品受熱均勻。 2、使用過程中,溫度變化出現異常,應及時停機檢查。
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2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明
1、原理及適用范圍
根據國家生活飲用水衛生標準,當水樣檢出總大腸菌群時,應進一步檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒有必要進行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗。
大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運用酶底物技術,含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經過44.5℃培養后,大腸埃希氏菌顯藍色,紫紅色或藍色菌斑都屬耐熱大腸菌群。
執行標準:生活飲用水衛生標準(GB 5749—2006)。
本產品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測。
2、操作方法
2.1、對于大腸菌群檢驗顯示陽性的紙片或產酸產氣的發酵管,用接種環挑取菌液,轉入2~3mL無菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養基凝固。
2.2、將接種好的測試片疊在一起放回到原來的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養箱中,堆疊片數不得超過12片,44.5℃培養15~24h觀察結果。
3、結果判讀
測試片上出現紫紅色或藍色菌斑都是耐熱大腸菌群陽性,其中藍色為大腸埃希氏菌陽性。沒有紫紅色或藍色斑點為陰性結果。
4、附加說明
耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長和發酵乳糖的菌群被稱為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準確和專一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門氏菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒、導致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細菌。能引起食物傳播性疾病,近年來,已經成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源于奶制品、禽產品和肉產品;雞肉和雞蛋尤其是高風險食品。沙門氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現問題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時服用抗生素類藥品,沙門氏菌感染將導致生命危險。
沙門氏菌測試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否帶有沙門氏菌,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。
本產品適用于肉和肉產品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將沙門氏菌測試片(BS205)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個樣品接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍色的菌落為其他菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、結果報告
在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。
5、附加說明
5.1、有關驗證試驗表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍色,葡萄球菌不生長。
5.2、測試片具有較強的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時仍可計算出菌落。臨床實際應用結果顯示陽性檢出率高于分離培養法1.84‰,復查準確率提高約13.0%(中國衛生檢驗雜志2006,16(8):954-955)。
5.3、陽性確認試驗推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測試片上可疑的沙門氏菌菌落,在對應上蓋膜上做好標記并編號。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報告25g樣品沙門氏菌陽性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽性,報告25g被檢樣品沙門氏菌陰性。
5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一,其侵襲力很強,能產生多種致病物質如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛生問題,我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。
金黃色葡萄球菌測試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養基和專一性的酶顯色劑,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序。
本產品適用于各類生、熟食制品,飲料,糕點類,調味品,奶制品等的快速檢測。
執行標準:食品衛生微生物學檢驗金黃色葡萄球菌計數——PetrifilmTM 測試片法(GB/T 4789.37—2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,調節樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,將金黃色葡萄球菌測試片(BT206)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
培養后,測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、計數原則及報告方式
通常選擇菌落數在15~150之間的稀釋度,兩張測試片菌落平均數乘以稀釋倍數,即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數,以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細可參考大腸桿菌大腸菌群測試片(BE203)的計數原則。
5、附加說明
5.1、本產品對于提高衛生行政監督部門應對細菌性食物中毒等突發性公共衛生事件的能力,具有重要的作用。
5.2、山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明,當金黃色葡萄球菌在0~9個菌落范圍內時,測試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標準要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。
5.3、經試驗,該測試片的檢測靈敏度高,特異性強,重復性好。對純菌的檢測下限可達3cfu/mL,與營養瓊脂計數、Baird-Parker培養計數和顯色培養基計數比較,檢測結果均無顯著差異。(食品研究與開發2009,30(1):94-97)
5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十二、副溶血弧菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌,海產品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據國家食源性疾病監測網統計,我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢,已成為我國一個嚴重的食源性公共衛生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續1~2天。
副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養基產品,含有高選擇性培養基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,更加適合衛生監督檢驗部門和食品生產加工企業使用。
本產品適用于水產品、海產品及其腌、熟制品、水產調味品等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固。每個樣品接種兩片,同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數非目的菌在測試片上不生長,少數能生長,如創傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍色,明顯區別于目的菌。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式
在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。
5、附加說明
5.1、根據出入境檢驗檢疫局技術中心所做的對比試驗結果表明,副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性,對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL,與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準(SN)方法符合率達到90%以上(中國衛生檢驗雜志2008,18(12):2621-2623)。
5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十三、大腸桿菌O157測試片使用說明
1、原理及適用范圍
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的并發癥。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十余個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。
大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程序,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。
本品適用于海產品、水產品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將大腸桿菌O157測試片(BO204)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3 、結果判讀
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式
報告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。
5、附加說明
5.1、本品所用培養基已在國外得到比較廣泛的應用,有關驗證試驗表明,接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑,準確率達到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。
5.2、經本公司檢測,大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為1 cfu/mL。
5.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十四、阪崎腸桿菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴重的神經系統后遺癥、發育障礙等癥狀,引起的死亡率高達50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關,奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導致感染的發生。
阪崎腸桿菌測試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預先制備好的一次性培養基產品,由阪崎腸桿菌選擇性培養基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡化了檢測程序,更加適合各級檢驗部門和食品生產企業使用。本產品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測。
參照標準:食品衛生微生物檢驗阪崎腸桿菌檢驗(GB/T4789.40-2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預熱至44℃裝有900mL專用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地搖動至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養6-8h。
2.2、接種:將阪崎腸桿菌測試片(BQ208)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL經過增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養基凝固,每個樣品接種兩片。做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽性結果;無任何點為陰性結果。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、結果報告
在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
5、附加說明
5.1 、經過試驗,測試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時,一加樣下去就會出現有紫色的點或暈狀,此為產品本身顯色劑的原因,不影響產品的使用和結果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。
5.2 、多次試驗結果阪崎腸桿菌測試片對純菌的最低檢測限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。
5.3 、專用增菌液的配制和滅菌:取一包專用增菌培養基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當天使用。有條件可采用高壓滅菌。
5.4 、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當,放置時間過長,使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產生的熱穩定毒素,而導致食物中毒的發生。中毒的發病率較高,一般為60%~100%。
蠟樣芽孢桿菌測試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養基產品,由選擇性培養基、高分子吸水凝膠和專一性酶指示劑等構成,一步培養顯色就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,對于提高細菌性食物中毒突發事件的反應能力具有重要的作用,同時也可在食品生產企業使用。
本產品適用于乳制品、肉類、淀粉類食品、各種甜點等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液。
2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測試片(BL210)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管每個梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對于出現陽性菌落的樣品,最好用其他方法作進一步的鑒定。
4、附加說明
4.1、本產品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,而大部分非目標菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。
4.2、初步試驗表明,蠟樣芽孢桿菌測試片對純菌的最低檢測限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測試片檢測了23種食品樣品,同時接種平皿做對比試驗。測試片檢出陽性樣品7個,檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽性樣品6個,檢出率為26.1%,測試片法比平皿法高了4.3%。
4.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。
十六、致病菌增菌檢測試劑盒使用說明
1、適用范圍
本品適用于食品及水中致病性沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測的前期增菌實驗觀察以及大腸菌群污染程度的檢測。
2、方法原理
依據國標GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術將相對應培養基包被在試劑盒底部,隨時取用。
3、樣品稀釋
同國標法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。
4、致病菌檢測
4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標號為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內。加樣后的1、2、3號分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。
4.2、 培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養6~18小時。
4.3 、觀察結果:如果某致病菌的增菌液發生渾濁,即預示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國標法進一步檢測。
5 、大腸菌檢測
5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗臺面上,打開盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標號為4、5、6的小培養基孔內。另用滅菌吸管分別吸取3個1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標號為7、8、9的小培養基孔內,標號為10的小培養基孔內可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養基陰性對照孔使用。
5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時可輕輕用力在桌面上敲擊數下排出氣泡。
5.3 、培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養18~24小時。
5.4 、觀察結果:樣液變為黃色為產酸、集氣窗中有氣泡為產氣,產酸產氣者為陽性結果,陽性結果的孔數越多,說明污染越嚴重。
6、注意事項
6.1、致病菌檢測與大腸菌檢測可同時進行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測培養前一定要排氣泡,在培養箱中取試劑盒時注意平托出來,避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽性集氣窗中的氣泡流失而影響結果判斷。
6.2、試劑盒為一次性無菌包裝用品,供一次性即開即用,。
7、保存條件和有效期
避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個月。
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3
3
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
14 17 20 24 27 31 |
2 2 2 2 2 2 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
12 14 17 20 22 25 |
3 3 3 3 3 3 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 24 28 32 36 |
2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片使用說明
1、原理及適用范圍
根據國家生活飲用水衛生標準,當水樣檢出總大腸菌群時,應進一步檢驗大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒有必要進行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗。
大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運用酶底物技術,含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經過44.5℃培養后,大腸埃希氏菌顯藍色,紫紅色或藍色菌斑都屬耐熱大腸菌群。
執行標準:生活飲用水衛生標準(GB 5749—2006)。
本產品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測。
2、操作方法
2.1、對于大腸菌群檢驗顯示陽性的紙片或產酸產氣的發酵管,用接種環挑取菌液,轉入2~3mL無菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養基凝固。
2.2、將接種好的測試片疊在一起放回到原來的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養箱中,堆疊片數不得超過12片,44.5℃培養15~24h觀察結果。
3、結果判讀
測試片上出現紫紅色或藍色菌斑都是耐熱大腸菌群陽性,其中藍色為大腸埃希氏菌陽性。沒有紫紅色或藍色斑點為陰性結果。
4、附加說明
耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長和發酵乳糖的菌群被稱為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準確和專一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門氏菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
沙門氏菌屬腸道細菌科,包括那些引起食物中毒、導致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細菌。能引起食物傳播性疾病,近年來,已經成為最常見的食物中毒原因。腸炎沙門氏菌感染通常源于奶制品、禽產品和肉產品;雞肉和雞蛋尤其是高風險食品。沙門氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現問題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時服用抗生素類藥品,沙門氏菌感染將導致生命危險。
沙門氏菌測試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養基、沙門氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否帶有沙門氏菌,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。
本產品適用于肉和肉產品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將沙門氏菌測試片(BS205)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個樣品接種兩片。同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養: 將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍色的菌落為其他菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、結果報告
在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門氏菌。
5、附加說明
5.1、有關驗證試驗表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍色,葡萄球菌不生長。
5.2、測試片具有較強的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時仍可計算出菌落。臨床實際應用結果顯示陽性檢出率高于分離培養法1.84‰,復查準確率提高約13.0%(中國衛生檢驗雜志2006,16(8):954-955)。
5.3、陽性確認試驗推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測試片上可疑的沙門氏菌菌落,在對應上蓋膜上做好標記并編號。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報告25g樣品沙門氏菌陽性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽性,報告25g被檢樣品沙門氏菌陰性。
5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡稱金葡菌)是人類最常見的致病菌之一,其侵襲力很強,能產生多種致病物質如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛生問題,我國每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報道。
金黃色葡萄球菌測試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養基和專一性的酶顯色劑,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序。
本產品適用于各類生、熟食制品,飲料,糕點類,調味品,奶制品等的快速檢測。
執行標準:食品衛生微生物學檢驗金黃色葡萄球菌計數——PetrifilmTM 測試片法(GB/T 4789.37—2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液,調節樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類推,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個稀釋度進行檢測,將金黃色葡萄球菌測試片(BT206)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
培養后,測試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、計數原則及報告方式
通常選擇菌落數在15~150之間的稀釋度,兩張測試片菌落平均數乘以稀釋倍數,即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數,以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細可參考大腸桿菌大腸菌群測試片(BE203)的計數原則。
5、附加說明
5.1、本產品對于提高衛生行政監督部門應對細菌性食物中毒等突發性公共衛生事件的能力,具有重要的作用。
5.2、山東省疾病預防控制中心的驗證結果表明,當金黃色葡萄球菌在0~9個菌落范圍內時,測試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標準要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗應用。
5.3、經試驗,該測試片的檢測靈敏度高,特異性強,重復性好。對純菌的檢測下限可達3cfu/mL,與營養瓊脂計數、Baird-Parker培養計數和顯色培養基計數比較,檢測結果均無顯著差異。(食品研究與開發2009,30(1):94-97)
5.4、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十二、副溶血弧菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細菌,海產品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據國家食源性疾病監測網統計,我國近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢,已成為我國一個嚴重的食源性公共衛生問題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續1~2天。
副溶血弧菌測試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養基產品,含有高選擇性培養基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養15~24h就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,更加適合衛生監督檢驗部門和食品生產加工企業使用。
本產品適用于水產品、海產品及其腌、熟制品、水產調味品等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將副溶血弧菌測試片(BH209)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固。每個樣品接種兩片,同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數非目的菌在測試片上不生長,少數能生長,如創傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍色,明顯區別于目的菌。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式
在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。
5、附加說明
5.1、根據出入境檢驗檢疫局技術中心所做的對比試驗結果表明,副溶血弧菌測試片具有較高的檢測靈敏度和準確性,對純菌的檢測靈敏度達到8cfu/mL,與中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業標準(SN)方法符合率達到90%以上(中國衛生檢驗雜志2008,18(12):2621-2623)。
5.2、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十三、大腸桿菌O157測試片使用說明
1、原理及適用范圍
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴重的并發癥。自1982年美國首次發現因該致病菌引起的食物中毒以來,腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開始逐漸擴散和蔓延,相繼在英國、加拿大、日本等多個國家引起腹瀉爆發和流行。我國已陸續有十余個省份在市售食品、進口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。
大腸桿菌O157測試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進口高選擇性顯色培養基作為主要原料,運用微生物測試片專有技術,做成一次性快速檢驗產品,一步培養15~24h就可確認,大大地簡化了檢測程序,非常適合各級檢驗部門和食品企業使用。
本品適用于海產品、水產品、各類熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將大腸桿菌O157測試片(BO204)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3 、結果判讀
對測試片進行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍色的菌落為其他大腸菌群。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、報告方式
報告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。
5、附加說明
5.1、本品所用培養基已在國外得到比較廣泛的應用,有關驗證試驗表明,接純菌種可以產生典型的紫紅色菌斑,準確率達到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。
5.2、經本公司檢測,大腸桿菌O157測試片對純菌的檢測靈敏度為1 cfu/mL。
5.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十四、阪崎腸桿菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴重的神經系統后遺癥、發育障礙等癥狀,引起的死亡率高達50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關,奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導致感染的發生。
阪崎腸桿菌測試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預先制備好的一次性培養基產品,由阪崎腸桿菌選擇性培養基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡化了檢測程序,更加適合各級檢驗部門和食品生產企業使用。本產品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測。
參照標準:食品衛生微生物檢驗阪崎腸桿菌檢驗(GB/T4789.40-2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預熱至44℃裝有900mL專用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地搖動至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養6-8h。
2.2、接種:將阪崎腸桿菌測試片(BQ208)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管吸取1mL經過增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養基凝固,每個樣品接種兩片。做一片空白陰性對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽性結果;無任何點為陰性結果。出現陽性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進行驗證,沒有條件的至少要再取樣重復檢驗一次。
4、結果報告
在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
5、附加說明
5.1 、經過試驗,測試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門氏菌等時,一加樣下去就會出現有紫色的點或暈狀,此為產品本身顯色劑的原因,不影響產品的使用和結果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。
5.2 、多次試驗結果阪崎腸桿菌測試片對純菌的最低檢測限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。
5.3 、專用增菌液的配制和滅菌:取一包專用增菌培養基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當天使用。有條件可采用高壓滅菌。
5.4 、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測試片使用說明
1、原理及適用范圍
蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當,放置時間過長,使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產生的熱穩定毒素,而導致食物中毒的發生。中毒的發病率較高,一般為60%~100%。
蠟樣芽孢桿菌測試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養基產品,由選擇性培養基、高分子吸水凝膠和專一性酶指示劑等構成,一步培養顯色就可確認是否有病原菌的存在,大大地簡化了檢測程序,對于提高細菌性食物中毒突發事件的反應能力具有重要的作用,同時也可在食品生產企業使用。
本產品適用于乳制品、肉類、淀粉類食品、各種甜點等的快速檢測。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質杯內,制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內,振搖后成為1:100的樣品勻液。
2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測試片(BL210)置于平坦實驗臺面,揭開上層膜,用無菌吸管每個梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養基凝固,每個稀釋度接種兩片,同時做一片空白對照。
2.3、培養:將測試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養箱內,堆疊片數不超過12片。培養溫度為36℃±1℃,培養15~24h。
3、結果判讀
對測試片進行觀察,呈藍綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對于出現陽性菌落的樣品,最好用其他方法作進一步的鑒定。
4、附加說明
4.1、本產品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產生典型的藍綠色點,而大部分非目標菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。
4.2、初步試驗表明,蠟樣芽孢桿菌測試片對純菌的最低檢測限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測試片檢測了23種食品樣品,同時接種平皿做對比試驗。測試片檢出陽性樣品7個,檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽性樣品6個,檢出率為26.1%,測試片法比平皿法高了4.3%。
4.3、注意使用過的測試片上帶有活菌,需及時按照生物安全廢棄物處理原則進行處理 。
十六、致病菌增菌檢測試劑盒使用說明
1、適用范圍
本品適用于食品及水中致病性沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測的前期增菌實驗觀察以及大腸菌群污染程度的檢測。
2、方法原理
依據國標GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術將相對應培養基包被在試劑盒底部,隨時取用。
3、樣品稀釋
同國標法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。
4、致病菌檢測
4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標號為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內。加樣后的1、2、3號分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。
4.2、 培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養6~18小時。
4.3 、觀察結果:如果某致病菌的增菌液發生渾濁,即預示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國標法進一步檢測。
5 、大腸菌檢測
5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗臺面上,打開盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標號為4、5、6的小培養基孔內。另用滅菌吸管分別吸取3個1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標號為7、8、9的小培養基孔內,標號為10的小培養基孔內可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養基陰性對照孔使用。
5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時可輕輕用力在桌面上敲擊數下排出氣泡。
5.3 、培養:將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養箱內培養18~24小時。
5.4 、觀察結果:樣液變為黃色為產酸、集氣窗中有氣泡為產氣,產酸產氣者為陽性結果,陽性結果的孔數越多,說明污染越嚴重。
6、注意事項
6.1、致病菌檢測與大腸菌檢測可同時進行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測培養前一定要排氣泡,在培養箱中取試劑盒時注意平托出來,避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽性集氣窗中的氣泡流失而影響結果判斷。
6.2、試劑盒為一次性無菌包裝用品,供一次性即開即用,。
7、保存條件和有效期
避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個月。
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便攜式恒溫培養箱
產品用途: 微生物、真菌毒素檢測時的恒溫培養使用
產品說明
一、適用范圍 微生物、真菌毒素檢測時的恒溫培養使用。
二、儀器特點 小巧、耐用、便于攜帶。即可在實驗室使用,又可采用車載電源轉換器在車中使用。
三、主要技術參數
工作室尺寸(mm):200×250×200
外形尺寸(mm):350×340×260
控溫范圍(℃):外界~45
電源電壓(V):220
功率(W):50
溫度波動(℃):±1
四、使用方法
1、將需培養的物品放入箱內,關好箱門。
2、接通電源,打開電源開關,指示燈亮,表示工作正常,儀表顯示工作室溫度,然后將按碼開關按到所需溫度(如37.0℃),綠燈亮表示通電升溫,紅燈亮表示斷電保溫,紅綠燈交替變化表示進入恒溫狀態,當儀器恒溫30min后,儀表顯示溫度和設定基本一致。并可通過按碼進行適當調節。
五、注意事項
1、工作室內物品擺放切勿過擠,以便于熱量循環,使物品受熱均勻。
2、使用過程中,溫度變化出現異常,應及時停機檢查。
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