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食品安全快速檢測(cè)箱 食品微生物采樣箱 水質(zhì)微生物采樣箱 恒溫培養(yǎng)箱 |
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產(chǎn)品名稱(chēng): |
食品安全快速檢測(cè)箱 食品微生物采樣箱 水質(zhì)微生物采樣箱 恒溫培養(yǎng)箱 |
產(chǎn)品型號(hào): |
食品安全快速檢測(cè)箱 食品微生物采樣箱 水質(zhì)微生物采樣箱 恒溫培養(yǎng)箱 |
產(chǎn)品產(chǎn)地: |
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產(chǎn)品特點(diǎn): |
上海華巖儀器設(shè)備有限公司供應(yīng)食品安全快速檢測(cè)箱 食品微生物采樣箱 水質(zhì)微生物采樣箱 恒溫培養(yǎng)箱 |
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食品安全快速檢測(cè)箱 食品微生物采樣箱 水質(zhì)微生物采樣箱 恒溫培養(yǎng)箱 詳細(xì)信息 |
上海華巖儀器設(shè)備有限公司供應(yīng)食品安全快速檢測(cè)箱 食品微生物采樣箱 水質(zhì)微生物采樣箱 恒溫培養(yǎng)箱
00002食品微生物采樣箱 產(chǎn)品用途: 食品中微生物快速檢測(cè)
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DA101食品安全快速檢測(cè)箱I 產(chǎn)品用途: 食品安全多項(xiàng)目檢測(cè)
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DA102食品安全快速檢測(cè)箱II 產(chǎn)品用途: 食品安全多項(xiàng)檢測(cè)
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DA103食品安全快速檢測(cè)箱III 產(chǎn)品用途: 食品安全多項(xiàng)檢測(cè)
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00001水質(zhì)微生物采樣箱 產(chǎn)品用途: 水質(zhì)中微生物快速檢測(cè)
水質(zhì)微生物采樣檢測(cè)箱 |
序號(hào) |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī) 格 |
適用范圍 |
1 |
菌落總數(shù)測(cè)試片 |
24片/包 |
各類(lèi)食品,桶裝飲用水,調(diào)味品,奶制品,蛋制品;也可用于與食品接觸的容器操作臺(tái)和其他設(shè)備表面現(xiàn)象的衛(wèi)生檢測(cè) |
2 |
飲用水大腸菌群檢驗(yàn)紙片(5管法) |
1份/包 |
生活飲用水、純凈水、礦泉水 |
3 |
水質(zhì)大腸菌群檢驗(yàn)紙片 (15管法) |
1份/包 |
水源水、生活飲用水、純凈水 |
4 |
水質(zhì)總大腸菌群檢測(cè)試劑盒 |
10份/盒 |
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5 |
大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群檢驗(yàn)紙片 |
24片/包 |
適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢驗(yàn) |
6 |
沙門(mén)氏菌測(cè)試片 |
24片/包 |
奶制品,乳制品,鮮、凍禽產(chǎn)品,肉和肉產(chǎn)品,蛋和蛋制品,冷凍飲品、飲料,飲用水,調(diào)味品,冷食菜,豆制品,糕點(diǎn),糖果,蜜餞,各種發(fā)酵酒,食用螺旋藻粉,即食動(dòng)物性水產(chǎn)干制品,即食藻類(lèi)食品,腌、醉制生食動(dòng)物性水產(chǎn)品 |
7 |
金黃色葡萄球菌測(cè)試片 |
24片/包 |
糕點(diǎn)類(lèi),糖果,蜜餞,奶制品,乳制品,豆制品,飲料及冷飲,各種發(fā)酵酒,各類(lèi)生、熟食畜禽肉及肉制品,涼拌食品,蛋及蛋制品,魚(yú)及水產(chǎn)品,調(diào)味品,干制食品,食用螺旋藻粉 |
8 |
大腸桿菌O157測(cè)試片 |
24片/包 |
海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、各類(lèi)熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品 |
9 |
副溶血弧菌測(cè)試片 |
24片/包 |
即食動(dòng)物性水產(chǎn)干制品,即食藻類(lèi)食品,腌、醉制生食動(dòng)物性水產(chǎn)品及其糜制品和熟制品,水產(chǎn)調(diào)味品 |
10 |
阪崎腸桿菌測(cè)試片 |
24片/包 |
奶粉、牛奶及奶制品 |
11 |
蠟樣芽胞桿菌測(cè)試片 |
24片/包 |
乳制品、肉類(lèi)、炒米飯、魚(yú)、土豆、淀粉類(lèi)食品、各種甜點(diǎn)、 涼拌蔬菜、水果、色拉 |
12 |
六種致病菌和大腸菌檢測(cè)試劑盒 |
1份/盒 |
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13 |
便攜式培養(yǎng)箱 |
選配 |
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14 |
說(shuō)明書(shū) |
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附箱配件:微型電子天平、紫外線消毒燈、可調(diào)式移液器、移液頭、防泄漏金屬酒精燈、酒精瓶、酒精瓶、消毒棉球、無(wú)菌樣品袋、無(wú)菌注射器、木制滅菌采樣板、采樣勺、采樣鑷、多功能剪刀、長(zhǎng)柄大號(hào)棉簽、一次性手套、試管架、帶蓋試管、一次性吸管、標(biāo)簽紙、記號(hào)筆、儲(chǔ)物盒。 |
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水質(zhì)微生物檢測(cè)系列產(chǎn)品 使用說(shuō)明書(shū)
目錄 (點(diǎn)擊文字進(jìn)入相應(yīng)使用說(shuō)明)
一、 適用范圍 二、 實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作及操作中的注意事項(xiàng) 三、 生活飲用水微生物常規(guī)指標(biāo)及限值 四、 檢測(cè)流程圖 五、 菌落總數(shù)測(cè)試片使用說(shuō)明 六、 飲用水大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說(shuō)明 七、 水質(zhì)大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說(shuō)明 八、 總大腸菌群檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明 九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片使用說(shuō)明 十、 沙門(mén)氏菌測(cè)試片使用說(shuō)明 十一、金黃色葡萄球菌測(cè)試片使用說(shuō)明 十二、副溶血弧菌測(cè)試片使用說(shuō)明 十三、大腸桿菌O157測(cè)試片使用說(shuō)明 十四、阪崎腸桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明 十五、蠟樣芽胞桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明 十六、致病菌增菌檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
一、適用范圍
適用于生活飲用水及其水源水中衛(wèi)生指標(biāo)菌與致病菌的日常監(jiān)測(cè)以及應(yīng)急檢測(cè)需要。
二、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作及操作中的注意事項(xiàng)
1、開(kāi)展微生物快速檢測(cè)所需的基本條件 1.1、 一間通風(fēng)良好、面積不需要很大的獨(dú)立房間,房間里最好備有紫外線消毒燈,洗手盆,實(shí)驗(yàn)臺(tái)。應(yīng)急檢測(cè)時(shí),臨時(shí)性的房間應(yīng)注意工作環(huán)境的的消毒(如采用84消毒液消毒等),并備好酒精燈。 1.2、 一臺(tái)高壓鍋或紅外線消毒柜(家用消毒碗柜也可。)應(yīng)急檢測(cè)時(shí),應(yīng)備好消毒液,含氯消毒液的濃度在250ppm時(shí),器皿消毒應(yīng)保持5分鐘以上。 1.3、 一臺(tái)小型恒溫培養(yǎng)箱; 1.4 、有條件時(shí),配備一臺(tái)普通冰箱,用于存放樣品; 1.5 、水質(zhì)微生物采樣檢測(cè)箱,箱內(nèi)備有采樣用具與實(shí)驗(yàn)用的一些工具和器皿; 1.6 、檢測(cè)用試紙與試劑盒。 1.7、 保存條件:所有微生物測(cè)試片產(chǎn)品均需存放在4~10℃冰箱中,保質(zhì)期為一年,鋁箔袋打開(kāi)后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好,放到冰箱中,一個(gè)月內(nèi)用完。在高濕度的環(huán)境中可能出現(xiàn)冷凝水,最好在拆封前將整包回溫至室溫。
2、移液器的消毒 移液器頭的消毒:將管頭放入錫箔袋或用錫箔紙包好,放入民用紅外線消毒柜中消毒;或?qū)⒐茴^放入消毒液中浸泡,取用時(shí)注意甩干消毒液并用無(wú)菌生理鹽水沖洗三次。
3、無(wú)菌操作和注意事項(xiàng) 3.1、點(diǎn)燃酒精燈,營(yíng)造局部無(wú)菌環(huán)境。取樣和加樣時(shí)盡量靠近酒精燈操作。能用火焰消毒的操作工具如鑷子、剪子、長(zhǎng)柄勺、小刀等應(yīng)在酒精燈上消毒后使用。 3.2、用75%酒精棉球?qū)⑹帜ú料尽?nbsp; 3.3、廢棄物及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
三、生活飲用水微生物常規(guī)指標(biāo)及限值
根據(jù)國(guó)家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—2006),常規(guī)的微生物指標(biāo)及限值如下:
指 標(biāo) |
限 值 |
菌落總數(shù)(CFU/mL) |
100 |
總大腸菌群(MPN/100mL或CFU/100mL) |
不得檢出 |
耐熱大腸菌群(MPN/100mL或CFU/100mL) |
不得檢出 |
大腸埃希氏菌(MPN/100mL或CFU/100mL) |
不得檢出 |
MPN表示最可能數(shù);CFU表示菌落形成單位。當(dāng)水樣檢出總大腸菌群時(shí),應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;水樣未檢出總大腸菌群,不必檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群。 |
四、檢測(cè)流程圖
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五、菌落總數(shù)測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 菌落總數(shù)是指樣品經(jīng)過(guò)處理,在一定條件下培養(yǎng)后所得1mL(g)檢樣或單位面積樣品中所含菌落的總數(shù),是最常用的微生物檢測(cè)項(xiàng)目。 菌落總數(shù)測(cè)試片(FilmplateTM Aerobic count plate BB202)是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有標(biāo)準(zhǔn)的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,冷水可溶性的吸水凝膠和脫氫酶指示劑氯化三苯基四氮唑(TTC),菌落在測(cè)試片上呈紅色,這樣可縮短計(jì)數(shù)時(shí)間和增強(qiáng)計(jì)數(shù)效果。 本產(chǎn)品適合于各類(lèi)食品及食品原料中菌落總數(shù)的測(cè)定,也可用于檢測(cè)食品加工容器、操作臺(tái)和其他設(shè)備表面的菌落總數(shù)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定——PetrifilmTM測(cè)試片法(GB/T 4789.2-2008 )。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,必要時(shí)用1mol/LNaOH或1mol/L HCl溶液調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.6~7.2。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,做出1:1000等稀釋度的樣品勻液,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如飲用純水和礦泉水等)可直接吸取原液進(jìn)行檢測(cè)。將菌落總數(shù)測(cè)試片(BB202)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。一般食品培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h;水產(chǎn)品培養(yǎng)溫度為30℃±1℃,培養(yǎng)48h。 3、結(jié)果判讀 細(xì)菌在測(cè)試片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn),選擇菌落數(shù)適中(30~300個(gè))的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每毫升(克)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。
4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 4.1、若只有一個(gè)稀釋度紙片上的菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi),計(jì)算兩個(gè)紙片菌落數(shù)的平均值,再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù),作為每毫升(或克)樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。 4.2、若有兩個(gè)連續(xù)稀釋度的紙片菌落數(shù)在適宜計(jì)數(shù)范圍內(nèi)時(shí),按式(1)計(jì)算: 式中: N——樣品中菌落數(shù); ∑C——測(cè)試片上(含適宜范圍菌落數(shù)的測(cè)試片)菌落數(shù)之和; n1——第一個(gè)適宜稀釋度測(cè)試片數(shù); n2——第二個(gè)適宜稀釋度測(cè)試片數(shù); d——稀釋因子(第一稀釋度)。 示例:
稀釋度 |
1:100(第一稀釋度) |
1:1000(第二稀釋度) |
菌落數(shù) |
232,244 |
33,35 |
上述數(shù)據(jù)經(jīng)“四舍五入”后,表示25000或2.5×104。 4.3、若所有的稀釋度菌落總數(shù)均大于300,則對(duì)稀釋度最高的測(cè)試片進(jìn)行計(jì)數(shù),其他測(cè)試片可記錄為多不可計(jì),結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.4、若所有的稀釋度菌落總數(shù)均小于30,則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.5、若所有的稀釋度(包括液體樣品原液)均無(wú)菌落生長(zhǎng),則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.6、若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30~300之間,其中一部分小于30或大于300,則以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計(jì)算。 4.7、菌落總數(shù)的報(bào)告 4.7.1、菌落總數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按“四舍五入”原則修約,采用兩位有效數(shù)字報(bào)告。 4.7.2、大于或等于100時(shí),第三位數(shù)字采用“四舍五入”原則修約后,取前兩位數(shù)字,后面的0代替位數(shù),也可用10的指數(shù)形式來(lái)表示,按“四舍五入”原則修約后,采用兩位有效數(shù)字。 4.7.3、若測(cè)試片上一片紅色無(wú)法計(jì)數(shù)時(shí),則報(bào)告多不可計(jì)。 4.7.4、若空白對(duì)照上有菌落生長(zhǎng),則此次檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。 4.7.5、稱(chēng)重取樣以CFU/g為單位報(bào)告,體積取樣以CFU/mL為單位報(bào)告。 5、表面取樣方法 加1mL滅菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)在測(cè)試片上,至少靜置5min,使培養(yǎng)基凝固;提起上層膜,使中央濾紙部分貼到待測(cè)物表面,用手在外側(cè)輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。 6、附加說(shuō)明 6.1、菌落總數(shù)測(cè)試片檢測(cè)結(jié)果與傳統(tǒng)平板計(jì)數(shù)瓊脂平板法符合率可達(dá)80%以上,山東省疾病預(yù)防控制中心進(jìn)行的驗(yàn)證試驗(yàn)表明,24h計(jì)數(shù)測(cè)試片上菌落數(shù)為平板菌落數(shù)的87%。 6.2、磷酸緩沖液稀釋液的配制與滅菌:貯存液:稱(chēng)取34.0g的磷酸二氫鉀溶于500mL蒸餾水中,用大約175mL的1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至7.2,用蒸餾水稀釋至1000mL后貯存于冰箱。稀釋液:取貯存液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000mL,分裝于適宜容器中,121℃高壓滅菌15分鐘,或者放入消毒碗柜中消毒。 6.3、生理鹽水的配制與滅菌:取8.5g分析純氯化鈉(NaCl)溶解到1000mL蒸餾水或純凈水中,先煮開(kāi)后進(jìn)行分裝,取9mL加入到10mL潔凈試管中,蓋上硅橡膠塞或棉紗塞,放入紅外線消毒柜中消毒。
六、飲用水大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說(shuō)明(五管法) 1、適用范圍 本產(chǎn)品適用于出廠成品水或直接飲用的礦泉水和純凈水中總大腸菌群的快速檢驗(yàn)。 2、方法原理 將乳糖、顯色劑和選擇性培養(yǎng)基加載在紙片上,經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長(zhǎng)并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽(yáng)性,記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù),根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—2006)。 3、操作方法 3.1、用滅菌吸管吸取10mL水樣加入裝有大紙片的塑料薄膜袋中,均勻涂布,共做5個(gè)重復(fù); 3.2、將接種好的紙片放于培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h觀察結(jié)果。 4、結(jié)果判讀 4.1、若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為大腸菌群陽(yáng)性,紙片保持紫藍(lán)色不變或在紫藍(lán)色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)但周?chē)鷽](méi)有黃暈均為大腸菌群陰性。 4.2、根據(jù)每個(gè)稀釋度的陽(yáng)性反應(yīng)紙片數(shù),查MPN表可得出水樣中總大腸菌群的MPN值(見(jiàn)表1)。如所有紙片均為陰性時(shí),可報(bào)告總大腸菌群未檢出。 4.3、對(duì)于陽(yáng)性紙片,應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群。用接種環(huán)在陽(yáng)性菌斑處沾取少許帶菌濾紙,用3mL滅菌生理鹽水混勻,接種到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片上,進(jìn)行44.5℃培養(yǎng)和檢驗(yàn)。
表1 用5份 10mL水樣時(shí)各種陽(yáng)性和陰性結(jié)果 組合時(shí)的最可能數(shù)(MPN)及95%可信限
陽(yáng)性紙片數(shù) |
最可能數(shù)(MPN/100mL) |
95%可信限 |
下限 |
上限 |
0 |
0 |
0 |
6.0 |
1 |
2.2 |
0.1 |
12.6 |
2 |
5.1 |
0.5 |
19.2 |
3 |
9.2 |
1.6 |
29.4 |
4 |
16.0 |
3.3 |
52.9 |
5 |
>16 |
8.0 |
無(wú)限 |
七、水質(zhì)大腸菌群檢驗(yàn)紙片使用說(shuō)明(十五管法)
1、適用范圍 適用于水源水、生活飲用水和其他水樣中大腸菌群的快速計(jì)數(shù)。 2、方法原理 將乳糖膽鹽選擇性培養(yǎng)基和TTC顯色劑加載在紙片上,經(jīng)培養(yǎng)后能夠在紙片上生長(zhǎng)并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的即為大腸菌群陽(yáng)性,記錄每個(gè)稀釋度大腸菌群陽(yáng)性紙片數(shù),根據(jù)大腸菌群MPN表查出相應(yīng)的大腸菌群數(shù)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB/T 5749—2006);生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法(GB/T 5750.12-2006)。 3、方法特點(diǎn) 與國(guó)標(biāo)法中的十五管法相對(duì)應(yīng),將原來(lái)幾步的試驗(yàn)簡(jiǎn)化為一步,時(shí)間由78h縮短為24h以內(nèi),省去了制備培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作,隨時(shí)可以打開(kāi)包裝進(jìn)行抽樣檢測(cè)。 4、操作方法 4.1、接種:用滅菌吸管吸取10mL水樣插入裝有大紙片的塑料薄膜袋中,均勻涂布,共做5個(gè)重復(fù);分別取1mL水樣加到小紙片中,共接5個(gè)重復(fù);另取1mL水樣加到9mL滅菌生理鹽水中混勻,用1mL滅菌吸管分別吸取1mL(即0.1mL水樣),加到最后5片小紙片中。 4.2、培養(yǎng):將接種好的紙片放于培養(yǎng)箱中,36℃±1℃培養(yǎng)15~24h。 5、結(jié)果判讀 觀察每片顏色變化,若紙片變黃或在黃色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn)為大腸菌群陽(yáng)性,若紙片保持紫藍(lán)色不變或在紫藍(lán)色背景上呈現(xiàn)紅色斑點(diǎn),但周?chē)鷽](méi)有黃色均為大腸菌群陰性。
6、結(jié)果報(bào)告 根據(jù)陽(yáng)性反應(yīng)紙片數(shù),查MPN表可得出水樣中大腸菌群的MPN值。如水樣污染嚴(yán)重含菌量較多,可將水樣稀釋成10-1和10-2再加到紙片上,即實(shí)際水樣加量為1mL、0.1mL、0.01mL水樣,其實(shí)際MPN值乘以10,以此類(lèi)推。 6.1、列舉說(shuō)明 假設(shè)檢驗(yàn)15張紙片陽(yáng)性數(shù)分別為5-3-1,那么查水質(zhì)大腸菌群MPN檢索表可知,大腸菌群的MPN值為每100mL水樣中110,如果接種量為1mL、0.1mL、0.01mL時(shí),MPN值為1100。
八、總大腸菌群檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明 1、適用范圍 適用于二次供水、自來(lái)水、水源水、生活飲用水、礦泉水等樣品中總大腸菌群檢測(cè)。對(duì)污染較嚴(yán)重的樣品采用十五管法,其它可采用五管檢測(cè)法。 2、方法原理 與國(guó)標(biāo)法相同。事先將乳糖蛋白胨培養(yǎng)基雙料、乳糖蛋白胨培養(yǎng)基單料濃縮至試劑盒培養(yǎng)孔中,隨時(shí)取用。 3、操作方法 3.1、十五管法:用無(wú)菌吸管吸取5個(gè)10mL水樣分別加入到試劑盒1號(hào)~5號(hào)5個(gè)大發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。吸取5個(gè)1mL水樣分別加入到試劑盒7號(hào)~11號(hào)5個(gè)小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。吸取5個(gè)用滅菌生理鹽水稀釋后的1:10稀釋液1mL加入到試劑盒12號(hào)~16號(hào)小發(fā)酵培養(yǎng)基孔內(nèi)。余孔可做對(duì)照。 3.2、五管法: 用無(wú)菌吸管吸取5個(gè)10mL水樣分別加入到試劑盒1號(hào)~5號(hào)5個(gè)大發(fā)酵培養(yǎng)基管(孔)內(nèi)。余孔可做對(duì)照。 3.3、排氣泡: 加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)次排出氣泡。 3.4、培養(yǎng):將加樣后的試劑盒置36℃± 1℃溫箱中,培養(yǎng)18h~24h。 3.5、觀察結(jié)果:樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣,產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽(yáng)性結(jié)果,可根據(jù)試劑盒的陽(yáng)性管數(shù),參照國(guó)標(biāo)GB/T5750.12-2006的方法,查表 MPN檢索表(表2或 表3),報(bào)告每100mL水樣中的總大腸菌群最可能數(shù)。如需對(duì)陽(yáng)性結(jié)果進(jìn)一步證實(shí),可參考GB/T5750.12-2006方法進(jìn)行。如所有管數(shù)均為陰性時(shí),可報(bào)告總大腸菌群未檢出。
4、 注意事項(xiàng) 4.1、加入樣品后不需搖勻,平拿平放。 4.2、加樣時(shí)可用一次性無(wú)菌塑料吸管,將樣品稀釋液加至試劑盒所標(biāo)刻度處。 4.3、在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)應(yīng)平托出來(lái),不要傾斜以免由于試劑盒的傾斜將陽(yáng)性管集氣窗中的氣泡排出而影響結(jié)果。 4.4、試劑盒為一次性無(wú)菌用品,供一次性使用。
表3 十五管法總大腸菌群(MPN)檢索表 (總接種量55.5 mL,其中5份10 mL水樣,5份1mL水樣,5份0.1 mL水樣)
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
0 0 0 0 0 0 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
<2 2 4 5 7 9 |
1 1 1 1 1 1 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
2 4 6 8 10 12 |
0 0 0 0 0 0 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
2 4 6 7 9 11 |
1 1 1 1 1 1 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
4 6 8 10 12 14 |
0 0 0 0 0 0 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
4 6 7 9 11 13 |
1 1 1 1 1 1 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
6 8 10 12 15 17 |
0 0 0 0 0 0 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
6 7 9 11 13 15 |
1 1 1 1 1 1 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
8 10 12 15 17 19 |
0 0 0 0 0 0 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
8 9 11 13 15 17 |
1 1 1 1 1 1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
11 13 15 17 19 22 |
0 0 0 0 0 0 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
9 11 13 15 17 19 |
1 1 1 1 1 1 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
13 15 17 19 22 24 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
2 2 2 2 2 2 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
5 7 9 12 14 16 |
3 3 3 3 3 3 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
8 11 13 16 20 23 |
2 2 2 2 2 2 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
7 9 12 14 17 19 |
3 3 3 3 3 3 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
11 14 17 20 23 27 |
2 2 2 2 2 2 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
9 12 14 17 19 22 |
3 3 3 3 3 3 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
14 17 20 24 27 31 |
2 2 2 2 2 2 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
12 14 17 20 22 25 |
3 3 3 3 3 3 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 24 28 32 36 |
2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 根據(jù)國(guó)家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)水樣檢出總大腸菌群時(shí),應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒(méi)有必要進(jìn)行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗(yàn)。 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運(yùn)用酶底物技術(shù),含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經(jīng)過(guò)44.5℃培養(yǎng)后,大腸埃希氏菌顯藍(lán)色,紫紅色或藍(lán)色菌斑都屬耐熱大腸菌群。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—2006)。 本產(chǎn)品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、對(duì)于大腸菌群檢驗(yàn)顯示陽(yáng)性的紙片或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管,用接種環(huán)挑取菌液,轉(zhuǎn)入2~3mL無(wú)菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。 2.2、將接種好的測(cè)試片疊在一起放回到原來(lái)的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養(yǎng)箱中,堆疊片數(shù)不得超過(guò)12片,44.5℃培養(yǎng)15~24h觀察結(jié)果。 3、結(jié)果判讀 測(cè)試片上出現(xiàn)紫紅色或藍(lán)色菌斑都是耐熱大腸菌群陽(yáng)性,其中藍(lán)色為大腸埃希氏菌陽(yáng)性。沒(méi)有紫紅色或藍(lán)色斑點(diǎn)為陰性結(jié)果。
4、附加說(shuō)明 耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養(yǎng)溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長(zhǎng)和發(fā)酵乳糖的菌群被稱(chēng)為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準(zhǔn)確和專(zhuān)一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說(shuō)明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門(mén)氏菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍 沙門(mén)氏菌屬腸道細(xì)菌科,包括那些引起食物中毒、導(dǎo)致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細(xì)菌。能引起食物傳播性疾病,近年來(lái),已經(jīng)成為最常見(jiàn)的食物中毒原因。腸炎沙門(mén)氏菌感染通常源于奶制品、禽產(chǎn)品和肉產(chǎn)品;雞肉和雞蛋尤其是高風(fēng)險(xiǎn)食品。沙門(mén)氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現(xiàn)問(wèn)題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續(xù)7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時(shí)服用抗生素類(lèi)藥品,沙門(mén)氏菌感染將導(dǎo)致生命危險(xiǎn)。 沙門(mén)氏菌測(cè)試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養(yǎng)基、沙門(mén)氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否帶有沙門(mén)氏菌,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于肉和肉產(chǎn)品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將沙門(mén)氏菌測(cè)試片(BS205)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng): 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門(mén)氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 4、結(jié)果報(bào)告 在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門(mén)氏菌。 5、附加說(shuō)明 5.1、有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍(lán)色,葡萄球菌不生長(zhǎng)。 5.2、測(cè)試片具有較強(qiáng)的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時(shí)仍可計(jì)算出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽(yáng)性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006,16(8):954-955)。 5.3、陽(yáng)性確認(rèn)試驗(yàn)推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測(cè)試片上可疑的沙門(mén)氏菌菌落,在對(duì)應(yīng)上蓋膜上做好標(biāo)記并編號(hào)。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報(bào)告25g樣品沙門(mén)氏菌陽(yáng)性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽(yáng)性,報(bào)告25g被檢樣品沙門(mén)氏菌陰性。 5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡(jiǎn)稱(chēng)金葡菌)是人類(lèi)最常見(jiàn)的致病菌之一,其侵襲力很強(qiáng),能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,我國(guó)每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道。 金黃色葡萄球菌測(cè)試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養(yǎng)基和專(zhuān)一性的酶顯色劑,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。 本產(chǎn)品適用于各類(lèi)生、熟食制品,飲料,糕點(diǎn)類(lèi),調(diào)味品,奶制品等的快速檢測(cè)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)——PetrifilmTM 測(cè)試片法(GB/T 4789.37—2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),將金黃色葡萄球菌測(cè)試片(BT206)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 培養(yǎng)后,測(cè)試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 通常選擇菌落數(shù)在15~150之間的稀釋度,兩張測(cè)試片菌落平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數(shù),以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細(xì)可參考大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片(BE203)的計(jì)數(shù)原則。 5、附加說(shuō)明 5.1、本產(chǎn)品對(duì)于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門(mén)應(yīng)對(duì)細(xì)菌性食物中毒等突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的能力,具有重要的作用。 5.2、山東省疾病預(yù)防控制中心的驗(yàn)證結(jié)果表明,當(dāng)金黃色葡萄球菌在0~9個(gè)菌落范圍內(nèi)時(shí),測(cè)試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標(biāo)準(zhǔn)要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)應(yīng)用。 5.3、經(jīng)試驗(yàn),該測(cè)試片的檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。對(duì)純菌的檢測(cè)下限可達(dá)3cfu/mL,與營(yíng)養(yǎng)瓊脂計(jì)數(shù)、Baird-Parker培養(yǎng)計(jì)數(shù)和顯色培養(yǎng)基計(jì)數(shù)比較,檢測(cè)結(jié)果均無(wú)顯著差異。(食品研究與開(kāi)發(fā)2009,30(1):94-97) 5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十二、副溶血弧菌測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌,海產(chǎn)品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國(guó)家食源性疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)統(tǒng)計(jì),我國(guó)近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢(shì),已成為我國(guó)一個(gè)嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續(xù)1~2天。 副溶血弧菌測(cè)試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將副溶血弧菌測(cè)試片(BH209)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)樣品接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測(cè)試片上不生長(zhǎng),少數(shù)能生長(zhǎng),如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍(lán)色,明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式 在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。 5、附加說(shuō)明 5.1、根據(jù)出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心所做的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明,副溶血弧菌測(cè)試片具有較高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性,對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度達(dá)到8cfu/mL,與中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN)方法符合率達(dá)到90%以上(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2008,18(12):2621-2623)。 5.2、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十三、大腸桿菌O157測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥。自1982年美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來(lái),腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開(kāi)始逐漸擴(kuò)散和蔓延,相繼在英國(guó)、加拿大、日本等多個(gè)國(guó)家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國(guó)已陸續(xù)有十余個(gè)省份在市售食品、進(jìn)口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。 大腸桿菌O157測(cè)試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進(jìn)口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn),大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。 本品適用于海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、各類(lèi)熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將大腸桿菌O157測(cè)試片(BO204)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3 、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式 報(bào)告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。 5、附加說(shuō)明 5.1、本品所用培養(yǎng)基已在國(guó)外得到比較廣泛的應(yīng)用,有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,準(zhǔn)確率達(dá)到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。 5.2、經(jīng)本公司檢測(cè),大腸桿菌O157測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度為1 cfu/mL。 5.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十四、阪崎腸桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動(dòng)物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀,引起的死亡率高達(dá)50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關(guān),奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導(dǎo)致感染的發(fā)生。 阪崎腸桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測(cè)。 參照標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)(GB/T4789.40-2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預(yù)熱至44℃裝有900mL專(zhuān)用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地?fù)u動(dòng)至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養(yǎng)6-8h。 2.2、接種:將阪崎腸桿菌測(cè)試片(BQ208)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL經(jīng)過(guò)增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽(yáng)性結(jié)果;無(wú)任何點(diǎn)為陰性結(jié)果。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告 在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。 5、附加說(shuō)明 5.1 、經(jīng)過(guò)試驗(yàn),測(cè)試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門(mén)氏菌等時(shí),一加樣下去就會(huì)出現(xiàn)有紫色的點(diǎn)或暈狀,此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因,不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。 5.2 、多次試驗(yàn)結(jié)果阪崎腸桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。 5.3 、專(zhuān)用增菌液的配制和滅菌:取一包專(zhuān)用增菌培養(yǎng)基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當(dāng)天使用。有條件可采用高壓滅菌。 5.4 、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍 蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當(dāng),放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長(zhǎng)繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素,而導(dǎo)致食物中毒的發(fā)生。中毒的發(fā)病率較高,一般為60%~100%。 蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由選擇性培養(yǎng)基、高分子吸水凝膠和專(zhuān)一性酶指示劑等構(gòu)成,一步培養(yǎng)顯色就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,對(duì)于提高細(xì)菌性食物中毒突發(fā)事件的反應(yīng)能力具有重要的作用,同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于乳制品、肉類(lèi)、淀粉類(lèi)食品、各種甜點(diǎn)等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液。 2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(BL210)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管每個(gè)梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對(duì)于出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣品,最好用其他方法作進(jìn)一步的鑒定。
4、附加說(shuō)明 4.1、本產(chǎn)品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。 4.2、初步試驗(yàn)表明,蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片檢測(cè)了23種食品樣品,同時(shí)接種平皿做對(duì)比試驗(yàn)。測(cè)試片檢出陽(yáng)性樣品7個(gè),檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽(yáng)性樣品6個(gè),檢出率為26.1%,測(cè)試片法比平皿法高了4.3%。 4.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
十六、致病菌增菌檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
1、適用范圍 本品適用于食品及水中致病性沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測(cè)的前期增菌實(shí)驗(yàn)觀察以及大腸菌群污染程度的檢測(cè)。 2、方法原理 依據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術(shù)將相對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基包被在試劑盒底部,隨時(shí)取用。 3、樣品稀釋 同國(guó)標(biāo)法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。 4、致病菌檢測(cè) 4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標(biāo)號(hào)為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內(nèi)。加樣后的1、2、3號(hào)分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門(mén)菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。 4.2、 培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6~18小時(shí)。 4.3 、觀察結(jié)果:如果某致病菌的增菌液發(fā)生渾濁,即預(yù)示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國(guó)標(biāo)法進(jìn)一步檢測(cè)。 5 、大腸菌檢測(cè) 5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗(yàn)臺(tái)面上,打開(kāi)盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個(gè)原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為4、5、6的小培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用滅菌吸管分別吸取3個(gè)1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為7、8、9的小培養(yǎng)基孔內(nèi),標(biāo)號(hào)為10的小培養(yǎng)基孔內(nèi)可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養(yǎng)基陰性對(duì)照孔使用。 5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下排出氣泡。 5.3 、培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18~24小時(shí)。 5.4 、觀察結(jié)果:樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣,產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的孔數(shù)越多,說(shuō)明污染越嚴(yán)重。
6、注意事項(xiàng) 6.1、致病菌檢測(cè)與大腸菌檢測(cè)可同時(shí)進(jìn)行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測(cè)培養(yǎng)前一定要排氣泡,在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)注意平托出來(lái),避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽(yáng)性集氣窗中的氣泡流失而影響結(jié)果判斷。 6.2、試劑盒為一次性無(wú)菌包裝用品,供一次性即開(kāi)即用,。 7、保存條件和有效期 避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個(gè)月。 |
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, ">3 3 3
|
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
14 17 20 24 27 31 |
2 2 2 2 2 2 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
12 14 17 20 22 25 |
3 3 3 3 3 3 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 24 28 32 36 |
2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 根據(jù)國(guó)家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)水樣檢出總大腸菌群時(shí),應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒(méi)有必要進(jìn)行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗(yàn)。 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運(yùn)用酶底物技術(shù),含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經(jīng)過(guò)44.5℃培養(yǎng)后,大腸埃希氏菌顯藍(lán)色,紫紅色或藍(lán)色菌斑都屬耐熱大腸菌群。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—2006)。 本產(chǎn)品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、對(duì)于大腸菌群檢驗(yàn)顯示陽(yáng)性的紙片或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管,用接種環(huán)挑取菌液,轉(zhuǎn)入2~3mL無(wú)菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。 2.2、將接種好的測(cè)試片疊在一起放回到原來(lái)的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養(yǎng)箱中,堆疊片數(shù)不得超過(guò)12片,44.5℃培養(yǎng)15~24h觀察結(jié)果。 3、結(jié)果判讀 測(cè)試片上出現(xiàn)紫紅色或藍(lán)色菌斑都是耐熱大腸菌群陽(yáng)性,其中藍(lán)色為大腸埃希氏菌陽(yáng)性。沒(méi)有紫紅色或藍(lán)色斑點(diǎn)為陰性結(jié)果。
4、附加說(shuō)明 耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養(yǎng)溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長(zhǎng)和發(fā)酵乳糖的菌群被稱(chēng)為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準(zhǔn)確和專(zhuān)一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說(shuō)明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門(mén)氏菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍 沙門(mén)氏菌屬腸道細(xì)菌科,包括那些引起食物中毒、導(dǎo)致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細(xì)菌。能引起食物傳播性疾病,近年來(lái),已經(jīng)成為最常見(jiàn)的食物中毒原因。腸炎沙門(mén)氏菌感染通常源于奶制品、禽產(chǎn)品和肉產(chǎn)品;雞肉和雞蛋尤其是高風(fēng)險(xiǎn)食品。沙門(mén)氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現(xiàn)問(wèn)題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續(xù)7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時(shí)服用抗生素類(lèi)藥品,沙門(mén)氏菌感染將導(dǎo)致生命危險(xiǎn)。 沙門(mén)氏菌測(cè)試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養(yǎng)基、沙門(mén)氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否帶有沙門(mén)氏菌,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于肉和肉產(chǎn)品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將沙門(mén)氏菌測(cè)試片(BS205)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng): 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門(mén)氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 4、結(jié)果報(bào)告 在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門(mén)氏菌。 5、附加說(shuō)明 5.1、有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍(lán)色,葡萄球菌不生長(zhǎng)。 5.2、測(cè)試片具有較強(qiáng)的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時(shí)仍可計(jì)算出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽(yáng)性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006,16(8):954-955)。 5.3、陽(yáng)性確認(rèn)試驗(yàn)推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測(cè)試片上可疑的沙門(mén)氏菌菌落,在對(duì)應(yīng)上蓋膜上做好標(biāo)記并編號(hào)。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報(bào)告25g樣品沙門(mén)氏菌陽(yáng)性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽(yáng)性,報(bào)告25g被檢樣品沙門(mén)氏菌陰性。 5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍 金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡(jiǎn)稱(chēng)金葡菌)是人類(lèi)最常見(jiàn)的致病菌之一,其侵襲力很強(qiáng),能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,我國(guó)每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道。 金黃色葡萄球菌測(cè)試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養(yǎng)基和專(zhuān)一性的酶顯色劑,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。 本產(chǎn)品適用于各類(lèi)生、熟食制品,飲料,糕點(diǎn)類(lèi),調(diào)味品,奶制品等的快速檢測(cè)。 執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)——PetrifilmTM 測(cè)試片法(GB/T 4789.37—2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,每次換一支吸管。 2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),將金黃色葡萄球菌測(cè)試片(BT206)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 培養(yǎng)后,測(cè)試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。 4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式 通常選擇菌落數(shù)在15~150之間的稀釋度,兩張測(cè)試片菌落平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數(shù),以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細(xì)可參考大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片(BE203)的計(jì)數(shù)原則。 5、附加說(shuō)明 5.1、本產(chǎn)品對(duì)于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門(mén)應(yīng)對(duì)細(xì)菌性食物中毒等突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的能力,具有重要的作用。 5.2、山東省疾病預(yù)防控制中心的驗(yàn)證結(jié)果表明,當(dāng)金黃色葡萄球菌在0~9個(gè)菌落范圍內(nèi)時(shí),測(cè)試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標(biāo)準(zhǔn)要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)應(yīng)用。 5.3、經(jīng)試驗(yàn),該測(cè)試片的檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。對(duì)純菌的檢測(cè)下限可達(dá)3cfu/mL,與營(yíng)養(yǎng)瓊脂計(jì)數(shù)、Baird-Parker培養(yǎng)計(jì)數(shù)和顯色培養(yǎng)基計(jì)數(shù)比較,檢測(cè)結(jié)果均無(wú)顯著差異。(食品研究與開(kāi)發(fā)2009,30(1):94-97) 5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十二、副溶血弧菌測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌,海產(chǎn)品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國(guó)家食源性疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)統(tǒng)計(jì),我國(guó)近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢(shì),已成為我國(guó)一個(gè)嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續(xù)1~2天。 副溶血弧菌測(cè)試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將副溶血弧菌測(cè)試片(BH209)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)樣品接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測(cè)試片上不生長(zhǎng),少數(shù)能生長(zhǎng),如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍(lán)色,明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式 在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。 5、附加說(shuō)明 5.1、根據(jù)出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心所做的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明,副溶血弧菌測(cè)試片具有較高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性,對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度達(dá)到8cfu/mL,與中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN)方法符合率達(dá)到90%以上(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2008,18(12):2621-2623)。 5.2、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十三、大腸桿菌O157測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥。自1982年美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來(lái),腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開(kāi)始逐漸擴(kuò)散和蔓延,相繼在英國(guó)、加拿大、日本等多個(gè)國(guó)家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國(guó)已陸續(xù)有十余個(gè)省份在市售食品、進(jìn)口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。 大腸桿菌O157測(cè)試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進(jìn)口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn),大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。 本品適用于海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、各類(lèi)熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。 2.2、接種:將大腸桿菌O157測(cè)試片(BO204)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3 、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式 報(bào)告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。 5、附加說(shuō)明 5.1、本品所用培養(yǎng)基已在國(guó)外得到比較廣泛的應(yīng)用,有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,準(zhǔn)確率達(dá)到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。 5.2、經(jīng)本公司檢測(cè),大腸桿菌O157測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度為1 cfu/mL。 5.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十四、阪崎腸桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明 1、原理及適用范圍 阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動(dòng)物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀,引起的死亡率高達(dá)50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關(guān),奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導(dǎo)致感染的發(fā)生。 阪崎腸桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測(cè)。 參照標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)(GB/T4789.40-2008)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預(yù)熱至44℃裝有900mL專(zhuān)用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地?fù)u動(dòng)至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養(yǎng)6-8h。 2.2、接種:將阪崎腸桿菌測(cè)試片(BQ208)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL經(jīng)過(guò)增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽(yáng)性結(jié)果;無(wú)任何點(diǎn)為陰性結(jié)果。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告 在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。 5、附加說(shuō)明 5.1 、經(jīng)過(guò)試驗(yàn),測(cè)試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門(mén)氏菌等時(shí),一加樣下去就會(huì)出現(xiàn)有紫色的點(diǎn)或暈狀,此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因,不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。 5.2 、多次試驗(yàn)結(jié)果阪崎腸桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。 5.3 、專(zhuān)用增菌液的配制和滅菌:取一包專(zhuān)用增菌培養(yǎng)基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當(dāng)天使用。有條件可采用高壓滅菌。 5.4 、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍 蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當(dāng),放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長(zhǎng)繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素,而導(dǎo)致食物中毒的發(fā)生。中毒的發(fā)病率較高,一般為60%~100%。 蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由選擇性培養(yǎng)基、高分子吸水凝膠和專(zhuān)一性酶指示劑等構(gòu)成,一步培養(yǎng)顯色就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,對(duì)于提高細(xì)菌性食物中毒突發(fā)事件的反應(yīng)能力具有重要的作用,同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。 本產(chǎn)品適用于乳制品、肉類(lèi)、淀粉類(lèi)食品、各種甜點(diǎn)等的快速檢測(cè)。 2、操作方法 2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液。 2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(BL210)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管每個(gè)梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白對(duì)照。 2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。 3、結(jié)果判讀 對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對(duì)于出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣品,最好用其他方法作進(jìn)一步的鑒定。
4、附加說(shuō)明 4.1、本產(chǎn)品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。 4.2、初步試驗(yàn)表明,蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片檢測(cè)了23種食品樣品,同時(shí)接種平皿做對(duì)比試驗(yàn)。測(cè)試片檢出陽(yáng)性樣品7個(gè),檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽(yáng)性樣品6個(gè),檢出率為26.1%,測(cè)試片法比平皿法高了4.3%。 4.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
十六、致病菌增菌檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
1、適用范圍 本品適用于食品及水中致病性沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測(cè)的前期增菌實(shí)驗(yàn)觀察以及大腸菌群污染程度的檢測(cè)。 2、方法原理 依據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術(shù)將相對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基包被在試劑盒底部,隨時(shí)取用。 3、樣品稀釋 同國(guó)標(biāo)法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。 4、致病菌檢測(cè) 4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標(biāo)號(hào)為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內(nèi)。加樣后的1、2、3號(hào)分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門(mén)菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。 4.2、 培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6~18小時(shí)。 4.3 、觀察結(jié)果:如果某致病菌的增菌液發(fā)生渾濁,即預(yù)示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國(guó)標(biāo)法進(jìn)一步檢測(cè)。 5 、大腸菌檢測(cè) 5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗(yàn)臺(tái)面上,打開(kāi)盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個(gè)原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為4、5、6的小培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用滅菌吸管分別吸取3個(gè)1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為7、8、9的小培養(yǎng)基孔內(nèi),標(biāo)號(hào)為10的小培養(yǎng)基孔內(nèi)可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養(yǎng)基陰性對(duì)照孔使用。 5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下排出氣泡。 5.3 、培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18~24小時(shí)。 5.4 、觀察結(jié)果:樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣,產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的孔數(shù)越多,說(shuō)明污染越嚴(yán)重。
6、注意事項(xiàng) 6.1、致病菌檢測(cè)與大腸菌檢測(cè)可同時(shí)進(jìn)行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測(cè)培養(yǎng)前一定要排氣泡,在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)注意平托出來(lái),避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽(yáng)性集氣窗中的氣泡流失而影響結(jié)果判斷。 6.2、試劑盒為一次性無(wú)菌包裝用品,供一次性即開(kāi)即用,。 7、保存條件和有效期 避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個(gè)月。 |
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便攜式恒溫培養(yǎng)箱 產(chǎn)品用途: 微生物、真菌毒素檢測(cè)時(shí)的恒溫培養(yǎng)使用 產(chǎn)品說(shuō)明 一、適用范圍 微生物、真菌毒素檢測(cè)時(shí)的恒溫培養(yǎng)使用。 二、儀器特點(diǎn) 小巧、耐用、便于攜帶。即可在實(shí)驗(yàn)室使用,又可采用車(chē)載電源轉(zhuǎn)換器在車(chē)中使用。 三、主要技術(shù)參數(shù) 工作室尺寸(mm):200×250×200 外形尺寸(mm):350×340×260 控溫范圍(℃):外界~45 電源電壓(V):220 功率(W):50 溫度波動(dòng)(℃):±1
四、使用方法 1、將需培養(yǎng)的物品放入箱內(nèi),關(guān)好箱門(mén)。 2、接通電源,打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),指示燈亮,表示工作正常,儀表顯示工作室溫度,然后將按碼開(kāi)關(guān)按到所需溫度(如37.0℃),綠燈亮表示通電升溫,紅燈亮表示斷電保溫,紅綠燈交替變化表示進(jìn)入恒溫狀態(tài),當(dāng)儀器恒溫30min后,儀表顯示溫度和設(shè)定基本一致。并可通過(guò)按碼進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。 五、注意事項(xiàng) 1、工作室內(nèi)物品擺放切勿過(guò)擠,以便于熱量循環(huán),使物品受熱均勻。 2、使用過(guò)程中,溫度變化出現(xiàn)異常,應(yīng)及時(shí)停機(jī)檢查。
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2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
9 12 14 17 19 22 |
3 3 3 3 3 3 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
14 17 20 24 27 31 |
2 2 2 2 2 2 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
12 14 17 20 22 25 |
3 3 3 3 3 3 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 24 28 32 36 |
2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
根據(jù)國(guó)家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)水樣檢出總大腸菌群時(shí),應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒(méi)有必要進(jìn)行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗(yàn)。
大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運(yùn)用酶底物技術(shù),含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經(jīng)過(guò)44.5℃培養(yǎng)后,大腸埃希氏菌顯藍(lán)色,紫紅色或藍(lán)色菌斑都屬耐熱大腸菌群。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—2006)。
本產(chǎn)品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、對(duì)于大腸菌群檢驗(yàn)顯示陽(yáng)性的紙片或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管,用接種環(huán)挑取菌液,轉(zhuǎn)入2~3mL無(wú)菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。
2.2、將接種好的測(cè)試片疊在一起放回到原來(lái)的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養(yǎng)箱中,堆疊片數(shù)不得超過(guò)12片,44.5℃培養(yǎng)15~24h觀察結(jié)果。
3、結(jié)果判讀
測(cè)試片上出現(xiàn)紫紅色或藍(lán)色菌斑都是耐熱大腸菌群陽(yáng)性,其中藍(lán)色為大腸埃希氏菌陽(yáng)性。沒(méi)有紫紅色或藍(lán)色斑點(diǎn)為陰性結(jié)果。
4、附加說(shuō)明
耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養(yǎng)溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長(zhǎng)和發(fā)酵乳糖的菌群被稱(chēng)為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準(zhǔn)確和專(zhuān)一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說(shuō)明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門(mén)氏菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
沙門(mén)氏菌屬腸道細(xì)菌科,包括那些引起食物中毒、導(dǎo)致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細(xì)菌。能引起食物傳播性疾病,近年來(lái),已經(jīng)成為最常見(jiàn)的食物中毒原因。腸炎沙門(mén)氏菌感染通常源于奶制品、禽產(chǎn)品和肉產(chǎn)品;雞肉和雞蛋尤其是高風(fēng)險(xiǎn)食品。沙門(mén)氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現(xiàn)問(wèn)題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續(xù)7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時(shí)服用抗生素類(lèi)藥品,沙門(mén)氏菌感染將導(dǎo)致生命危險(xiǎn)。
沙門(mén)氏菌測(cè)試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養(yǎng)基、沙門(mén)氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否帶有沙門(mén)氏菌,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。
本產(chǎn)品適用于肉和肉產(chǎn)品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將沙門(mén)氏菌測(cè)試片(BS205)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng): 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門(mén)氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告
在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門(mén)氏菌。
5、附加說(shuō)明
5.1、有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍(lán)色,葡萄球菌不生長(zhǎng)。
5.2、測(cè)試片具有較強(qiáng)的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時(shí)仍可計(jì)算出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽(yáng)性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006,16(8):954-955)。
5.3、陽(yáng)性確認(rèn)試驗(yàn)推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測(cè)試片上可疑的沙門(mén)氏菌菌落,在對(duì)應(yīng)上蓋膜上做好標(biāo)記并編號(hào)。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報(bào)告25g樣品沙門(mén)氏菌陽(yáng)性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽(yáng)性,報(bào)告25g被檢樣品沙門(mén)氏菌陰性。
5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡(jiǎn)稱(chēng)金葡菌)是人類(lèi)最常見(jiàn)的致病菌之一,其侵襲力很強(qiáng),能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,我國(guó)每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道。
金黃色葡萄球菌測(cè)試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養(yǎng)基和專(zhuān)一性的酶顯色劑,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。
本產(chǎn)品適用于各類(lèi)生、熟食制品,飲料,糕點(diǎn)類(lèi),調(diào)味品,奶制品等的快速檢測(cè)。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)——PetrifilmTM 測(cè)試片法(GB/T 4789.37—2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),將金黃色葡萄球菌測(cè)試片(BT206)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
培養(yǎng)后,測(cè)試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式
通常選擇菌落數(shù)在15~150之間的稀釋度,兩張測(cè)試片菌落平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數(shù),以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細(xì)可參考大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片(BE203)的計(jì)數(shù)原則。
5、附加說(shuō)明
5.1、本產(chǎn)品對(duì)于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門(mén)應(yīng)對(duì)細(xì)菌性食物中毒等突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的能力,具有重要的作用。
5.2、山東省疾病預(yù)防控制中心的驗(yàn)證結(jié)果表明,當(dāng)金黃色葡萄球菌在0~9個(gè)菌落范圍內(nèi)時(shí),測(cè)試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標(biāo)準(zhǔn)要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)應(yīng)用。
5.3、經(jīng)試驗(yàn),該測(cè)試片的檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。對(duì)純菌的檢測(cè)下限可達(dá)3cfu/mL,與營(yíng)養(yǎng)瓊脂計(jì)數(shù)、Baird-Parker培養(yǎng)計(jì)數(shù)和顯色培養(yǎng)基計(jì)數(shù)比較,檢測(cè)結(jié)果均無(wú)顯著差異。(食品研究與開(kāi)發(fā)2009,30(1):94-97)
5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十二、副溶血弧菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌,海產(chǎn)品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國(guó)家食源性疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)統(tǒng)計(jì),我國(guó)近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢(shì),已成為我國(guó)一個(gè)嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續(xù)1~2天。
副溶血弧菌測(cè)試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。
本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將副溶血弧菌測(cè)試片(BH209)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)樣品接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測(cè)試片上不生長(zhǎng),少數(shù)能生長(zhǎng),如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍(lán)色,明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式
在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。
5、附加說(shuō)明
5.1、根據(jù)出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心所做的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明,副溶血弧菌測(cè)試片具有較高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性,對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度達(dá)到8cfu/mL,與中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN)方法符合率達(dá)到90%以上(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2008,18(12):2621-2623)。
5.2、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十三、大腸桿菌O157測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥。自1982年美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來(lái),腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開(kāi)始逐漸擴(kuò)散和蔓延,相繼在英國(guó)、加拿大、日本等多個(gè)國(guó)家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國(guó)已陸續(xù)有十余個(gè)省份在市售食品、進(jìn)口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。
大腸桿菌O157測(cè)試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進(jìn)口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn),大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。
本品適用于海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、各類(lèi)熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將大腸桿菌O157測(cè)試片(BO204)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3 、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式
報(bào)告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。
5、附加說(shuō)明
5.1、本品所用培養(yǎng)基已在國(guó)外得到比較廣泛的應(yīng)用,有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,準(zhǔn)確率達(dá)到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。
5.2、經(jīng)本公司檢測(cè),大腸桿菌O157測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度為1 cfu/mL。
5.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十四、阪崎腸桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動(dòng)物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀,引起的死亡率高達(dá)50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關(guān),奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導(dǎo)致感染的發(fā)生。
阪崎腸桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測(cè)。
參照標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)(GB/T4789.40-2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預(yù)熱至44℃裝有900mL專(zhuān)用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地?fù)u動(dòng)至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養(yǎng)6-8h。
2.2、接種:將阪崎腸桿菌測(cè)試片(BQ208)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL經(jīng)過(guò)增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽(yáng)性結(jié)果;無(wú)任何點(diǎn)為陰性結(jié)果。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告
在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
5、附加說(shuō)明
5.1 、經(jīng)過(guò)試驗(yàn),測(cè)試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門(mén)氏菌等時(shí),一加樣下去就會(huì)出現(xiàn)有紫色的點(diǎn)或暈狀,此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因,不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。
5.2 、多次試驗(yàn)結(jié)果阪崎腸桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。
5.3 、專(zhuān)用增菌液的配制和滅菌:取一包專(zhuān)用增菌培養(yǎng)基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當(dāng)天使用。有條件可采用高壓滅菌。
5.4 、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當(dāng),放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長(zhǎng)繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素,而導(dǎo)致食物中毒的發(fā)生。中毒的發(fā)病率較高,一般為60%~100%。
蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由選擇性培養(yǎng)基、高分子吸水凝膠和專(zhuān)一性酶指示劑等構(gòu)成,一步培養(yǎng)顯色就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,對(duì)于提高細(xì)菌性食物中毒突發(fā)事件的反應(yīng)能力具有重要的作用,同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。
本產(chǎn)品適用于乳制品、肉類(lèi)、淀粉類(lèi)食品、各種甜點(diǎn)等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液。
2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(BL210)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管每個(gè)梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對(duì)于出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣品,最好用其他方法作進(jìn)一步的鑒定。
4、附加說(shuō)明
4.1、本產(chǎn)品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。
4.2、初步試驗(yàn)表明,蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片檢測(cè)了23種食品樣品,同時(shí)接種平皿做對(duì)比試驗(yàn)。測(cè)試片檢出陽(yáng)性樣品7個(gè),檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽(yáng)性樣品6個(gè),檢出率為26.1%,測(cè)試片法比平皿法高了4.3%。
4.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
十六、致病菌增菌檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
1、適用范圍
本品適用于食品及水中致病性沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測(cè)的前期增菌實(shí)驗(yàn)觀察以及大腸菌群污染程度的檢測(cè)。
2、方法原理
依據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術(shù)將相對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基包被在試劑盒底部,隨時(shí)取用。
3、樣品稀釋
同國(guó)標(biāo)法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。
4、致病菌檢測(cè)
4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標(biāo)號(hào)為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內(nèi)。加樣后的1、2、3號(hào)分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門(mén)菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。
4.2、 培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6~18小時(shí)。
4.3 、觀察結(jié)果:如果某致病菌的增菌液發(fā)生渾濁,即預(yù)示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國(guó)標(biāo)法進(jìn)一步檢測(cè)。
5 、大腸菌檢測(cè)
5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗(yàn)臺(tái)面上,打開(kāi)盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個(gè)原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為4、5、6的小培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用滅菌吸管分別吸取3個(gè)1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為7、8、9的小培養(yǎng)基孔內(nèi),標(biāo)號(hào)為10的小培養(yǎng)基孔內(nèi)可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養(yǎng)基陰性對(duì)照孔使用。
5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下排出氣泡。
5.3 、培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18~24小時(shí)。
5.4 、觀察結(jié)果:樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣,產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的孔數(shù)越多,說(shuō)明污染越嚴(yán)重。
6、注意事項(xiàng)
6.1、致病菌檢測(cè)與大腸菌檢測(cè)可同時(shí)進(jìn)行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測(cè)培養(yǎng)前一定要排氣泡,在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)注意平托出來(lái),避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽(yáng)性集氣窗中的氣泡流失而影響結(jié)果判斷。
6.2、試劑盒為一次性無(wú)菌包裝用品,供一次性即開(kāi)即用,。
7、保存條件和有效期
避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個(gè)月。
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, ">3
3
3
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
14 17 20 24 27 31 |
2 2 2 2 2 2 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
12 14 17 20 22 25 |
3 3 3 3 3 3 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 24 28 32 36 |
2 2 2 2 2 2 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
15 17 20 23 25 28 |
3 3 3 3 3 3 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
21 24 28 32 36 40 |
2 2 2 2 2 2 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
17 20 23 26 29 32 |
3 3 3 3 3 3 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
25 29 32 37 41 45 |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
接種量,mL |
總大腸菌群 (MPN/100mL) |
10 |
1 |
0.1 |
10 |
1 |
0.1 |
4 4 4 4 4 4 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
13 17 21 25 30 36 |
5 5 5 5 5 5 |
0 0 0 0 0 0 |
0 1 2 3 4 5 |
23 31 43 58 76 95 |
4 4 4 4 4 4 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
17 21 26 31 36 42 |
5 5 5 5 5 5 |
1 1 1 1 1 1 |
0 1 2 3 4 5 |
33 46 63 84 110 130 |
4 4 4 4 4 4 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
22 26 32 38 44 50 |
5 5 5 5 5 5 |
2 2 2 2 2 2 |
0 1 2 3 4 5 |
49 70 94 120 150 180 |
4 4 4 4 4 4 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
27 33 39 45 52 59 |
5 5 5 5 5 5 |
3 3 3 3 3 3 |
0 1 2 3 4 5 |
79 110 140 180 210 250 |
4 4 4 4 4 4 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
34 40 47 54 62 69 |
5 5 5 5 5 5 |
4 4 4 4 4 4 |
0 1 2 3 4 5 |
130 170 220 280 350 430 |
4 4 4 4 4 4 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
41 48 56 64 72 81 |
5 5 5 5 5 5 |
5 5 5 5 5 5 |
0 1 2 3 4 5 |
240 350 540 920 1600 >1600 |
九、 大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
根據(jù)國(guó)家生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn),當(dāng)水樣檢出總大腸菌群時(shí),應(yīng)進(jìn)一步檢驗(yàn)大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群;如果水樣未檢出總大腸菌群,則沒(méi)有必要進(jìn)行大腸埃希氏菌或耐熱大腸菌群的檢驗(yàn)。
大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片(FilmplateTM E.coli&thermotolerant coliformbacteria count plate BE213)運(yùn)用酶底物技術(shù),含有大腸埃希氏菌特有葡萄糖醛酸酶(glucuronidase)的顯色底物(XGLUC/blue),以及耐熱大腸菌群半乳糖苷酶(galactosidase)的顯色底物(SalmonGal/red), 經(jīng)過(guò)44.5℃培養(yǎng)后,大腸埃希氏菌顯藍(lán)色,紫紅色或藍(lán)色菌斑都屬耐熱大腸菌群。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)(GB 5749—2006)。
本產(chǎn)品適用于各種水樣中大腸埃希氏菌和耐熱大腸菌群的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、對(duì)于大腸菌群檢驗(yàn)顯示陽(yáng)性的紙片或產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管,用接種環(huán)挑取菌液,轉(zhuǎn)入2~3mL無(wú)菌磷酸緩沖液(或生理鹽水)中混勻,用滅菌吸管吸取1mL慢慢均勻地滴加到大腸埃希氏菌耐熱大腸菌群測(cè)試片上,然后放下上層膜,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固。
2.2、將接種好的測(cè)試片疊在一起放回到原來(lái)的自封袋中,并封口,透明面朝上水平放于培養(yǎng)箱中,堆疊片數(shù)不得超過(guò)12片,44.5℃培養(yǎng)15~24h觀察結(jié)果。
3、結(jié)果判讀
測(cè)試片上出現(xiàn)紫紅色或藍(lán)色菌斑都是耐熱大腸菌群陽(yáng)性,其中藍(lán)色為大腸埃希氏菌陽(yáng)性。沒(méi)有紫紅色或藍(lán)色斑點(diǎn)為陰性結(jié)果。
4、附加說(shuō)明
耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)是總大腸菌群的一部分,將培養(yǎng)溫度提高到44~45℃,在此條件下仍能生長(zhǎng)和發(fā)酵乳糖的菌群被稱(chēng)為耐熱大腸菌群。它們由埃希氏菌屬以及克雷伯菌屬、腸桿菌屬和檸檬酸桿菌屬中的一些菌種組成。其中大腸埃希氏菌(E.coli) 是最準(zhǔn)確和專(zhuān)一的糞便污染指示菌。與總大腸菌群相比,耐熱大腸菌群在水體中的檢出,說(shuō)明水體更為不清潔,存在腸道致病菌和食物中毒菌的可能性更大。
十、 沙門(mén)氏菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
沙門(mén)氏菌屬腸道細(xì)菌科,包括那些引起食物中毒、導(dǎo)致腸胃炎、傷寒和副傷寒的細(xì)菌。能引起食物傳播性疾病,近年來(lái),已經(jīng)成為最常見(jiàn)的食物中毒原因。腸炎沙門(mén)氏菌感染通常源于奶制品、禽產(chǎn)品和肉產(chǎn)品;雞肉和雞蛋尤其是高風(fēng)險(xiǎn)食品。沙門(mén)氏菌感染的癥狀通常是腸胃出現(xiàn)問(wèn)題,包括惡心、腹部絞痛、嘔吐和腹瀉,一般最多持續(xù)7天。在免疫力低下的人群中,如果不及時(shí)服用抗生素類(lèi)藥品,沙門(mén)氏菌感染將導(dǎo)致生命危險(xiǎn)。
沙門(mén)氏菌測(cè)試片(FilmplateTM Salmonella test plate BS205)含有選擇性培養(yǎng)基、沙門(mén)氏菌特有辛酯酶的顯色指示劑和高分子吸水凝膠,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否帶有沙門(mén)氏菌,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。
本產(chǎn)品適用于肉和肉產(chǎn)品、蛋及蛋制品、冷飲等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將沙門(mén)氏菌測(cè)試片(BS205)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng): 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口。透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為沙門(mén)氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告
在25mL(或25g)樣品中檢出或未檢出沙門(mén)氏菌。
5、附加說(shuō)明
5.1、有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種(包括硫化氫陰性菌株)可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,其他腸桿菌呈藍(lán)色,葡萄球菌不生長(zhǎng)。
5.2、測(cè)試片具有較強(qiáng)的敏感性,在1.5×10-8稀釋度時(shí)仍可計(jì)算出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽(yáng)性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰,復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2006,16(8):954-955)。
5.3、陽(yáng)性確認(rèn)試驗(yàn)推薦使用氧化酶試紙法,具體操作是:選擇測(cè)試片上可疑的沙門(mén)氏菌菌落,在對(duì)應(yīng)上蓋膜上做好標(biāo)記并編號(hào)。將氧化酶試紙貼在可疑菌落上,蓋上上蓋膜等待30s左右,如果氧化酶試紙顏色不變則為氧化酶陰性,可以報(bào)告25g樣品沙門(mén)氏菌陽(yáng)性,反之,試紙片變紅,則氧化酶陽(yáng)性,報(bào)告25g被檢樣品沙門(mén)氏菌陰性。
5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十一、金黃色葡萄球菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus 簡(jiǎn)稱(chēng)金葡菌)是人類(lèi)最常見(jiàn)的致病菌之一,其侵襲力很強(qiáng),能產(chǎn)生多種致病物質(zhì)如:腸毒素、凝固酶等;可引起化膿性炎癥、毒素性疾病及葡萄球菌性腸炎。金葡菌所引起的中毒事件已成為世界性的公共衛(wèi)生問(wèn)題,我國(guó)每年由金葡菌引起的食物中毒事件屢有報(bào)道。
金黃色葡萄球菌測(cè)試片(FilmplateTM Staphylococcus aureus test plate BT206) 含有選擇性培養(yǎng)基和專(zhuān)一性的酶顯色劑,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序。
本產(chǎn)品適用于各類(lèi)生、熟食制品,飲料,糕點(diǎn)類(lèi),調(diào)味品,奶制品等的快速檢測(cè)。
執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)金黃色葡萄球菌計(jì)數(shù)——PetrifilmTM 測(cè)試片法(GB/T 4789.37—2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液,調(diào)節(jié)樣品勻液pH至6.0~8.0。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液,以此類(lèi)推,每次換一支吸管。
2.2、接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),將金黃色葡萄球菌測(cè)試片(BT206)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
培養(yǎng)后,測(cè)試片上紫紅色的菌落為金黃色葡萄球菌;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、計(jì)數(shù)原則及報(bào)告方式
通常選擇菌落數(shù)在15~150之間的稀釋度,兩張測(cè)試片菌落平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即為每毫升(或克)樣品中金黃色葡萄球菌數(shù),以CFU/mL或(CFU/g)表示。詳細(xì)可參考大腸桿菌大腸菌群測(cè)試片(BE203)的計(jì)數(shù)原則。
5、附加說(shuō)明
5.1、本產(chǎn)品對(duì)于提高衛(wèi)生行政監(jiān)督部門(mén)應(yīng)對(duì)細(xì)菌性食物中毒等突發(fā)性公共衛(wèi)生事件的能力,具有重要的作用。
5.2、山東省疾病預(yù)防控制中心的驗(yàn)證結(jié)果表明,當(dāng)金黃色葡萄球菌在0~9個(gè)菌落范圍內(nèi)時(shí),測(cè)試片與血平板均能檢出,作為致病菌不得檢出的標(biāo)準(zhǔn)要求,可以作為金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)應(yīng)用。
5.3、經(jīng)試驗(yàn),該測(cè)試片的檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好。對(duì)純菌的檢測(cè)下限可達(dá)3cfu/mL,與營(yíng)養(yǎng)瓊脂計(jì)數(shù)、Baird-Parker培養(yǎng)計(jì)數(shù)和顯色培養(yǎng)基計(jì)數(shù)比較,檢測(cè)結(jié)果均無(wú)顯著差異。(食品研究與開(kāi)發(fā)2009,30(1):94-97)
5.4、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十二、副溶血弧菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一種廣泛分布于海洋與鹽湖中的嗜鹽性細(xì)菌,海產(chǎn)品中常有此菌,它是引起食源性疾病的主要病原之一,是夏、秋季沿海地區(qū)食物中毒和急性腹瀉的重要病原。據(jù)國(guó)家食源性疾病監(jiān)測(cè)網(wǎng)統(tǒng)計(jì),我國(guó)近年由副溶血弧菌引起的食物中毒呈顯著上升趨勢(shì),已成為我國(guó)一個(gè)嚴(yán)重的食源性公共衛(wèi)生問(wèn)題之一。該菌引起的食物中毒臨床上表現(xiàn)為:上腹部疼痛、腹瀉、惡心、嘔吐、發(fā)熱等,腹瀉多為水樣便,亦有大便膿血,隨后腹部劇烈疼痛,持續(xù)1~2天。
副溶血弧菌測(cè)試片(FilmplateTM Vibrio parahaemolyticus test plate BH209)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,含有高選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異酶指示劑等重要成分,培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合衛(wèi)生監(jiān)督檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)加工企業(yè)使用。
本產(chǎn)品適用于水產(chǎn)品、海產(chǎn)品及其腌、熟制品、水產(chǎn)調(diào)味品等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌3.5%氯化鈉水溶液的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將副溶血弧菌測(cè)試片(BH209)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)樣品接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
呈紫色的菌落為副溶血弧菌。多數(shù)非目的菌在測(cè)試片上不生長(zhǎng),少數(shù)能生長(zhǎng),如創(chuàng)傷弧菌和霍亂弧菌,但菌落呈藍(lán)色,明顯區(qū)別于目的菌。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式
在25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出副溶血性弧菌。
5、附加說(shuō)明
5.1、根據(jù)出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心所做的對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果表明,副溶血弧菌測(cè)試片具有較高的檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性,對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度達(dá)到8cfu/mL,與中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN)方法符合率達(dá)到90%以上(中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志2008,18(12):2621-2623)。
5.2、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十三、大腸桿菌O157測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
腸出血性大腸桿菌O157:H7是一種新出現(xiàn)的食物傳播性疾病的病因。它除了引起腹瀉、出血性腸炎外,還可發(fā)生溶血性尿毒綜合癥、血栓性血小板減少性紫癜等嚴(yán)重的并發(fā)癥。自1982年美國(guó)首次發(fā)現(xiàn)因該致病菌引起的食物中毒以來(lái),腸出血性大腸桿菌O157:H7疫情開(kāi)始逐漸擴(kuò)散和蔓延,相繼在英國(guó)、加拿大、日本等多個(gè)國(guó)家引起腹瀉爆發(fā)和流行。我國(guó)已陸續(xù)有十余個(gè)省份在市售食品、進(jìn)口食品、腹瀉病患者、家畜家禽等分離到大腸桿菌O157:H7。
大腸桿菌O157測(cè)試片(FilmplateTM E.coli O157 test plate BO204)采用進(jìn)口高選擇性顯色培養(yǎng)基作為主要原料,運(yùn)用微生物測(cè)試片專(zhuān)有技術(shù),做成一次性快速檢驗(yàn)產(chǎn)品,一步培養(yǎng)15~24h就可確認(rèn),大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,非常適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品企業(yè)使用。
本品適用于海產(chǎn)品、水產(chǎn)品、各類(lèi)熟肉制品和冷葷、蛋及蛋制品等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。
2.2、接種:將大腸桿菌O157測(cè)試片(BO204)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL樣品勻液緩慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右使培養(yǎng)基凝固,最后用手輕輕地壓一下,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3 、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈紫紅色的菌落為大腸桿菌O157;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌群。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、報(bào)告方式
報(bào)告每25g(或25ml)樣品中檢出或未檢出大腸桿菌O157。
5、附加說(shuō)明
5.1、本品所用培養(yǎng)基已在國(guó)外得到比較廣泛的應(yīng)用,有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明,接純菌種可以產(chǎn)生典型的紫紅色菌斑,準(zhǔn)確率達(dá)到98%(K.A. Bettelheim. 1998. J. Clin. Microbiol.85:425-428)。
5.2、經(jīng)本公司檢測(cè),大腸桿菌O157測(cè)試片對(duì)純菌的檢測(cè)靈敏度為1 cfu/mL。
5.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十四、阪崎腸桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
阪崎腸桿菌(Enterobacter sakazakii )存在于腸道中,在一定條件下可引起人和動(dòng)物致病。能引起新生兒腦膜炎、致死性小腸結(jié)腸炎和菌血癥等疾病,且伴隨有嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥、發(fā)育障礙等癥狀,引起的死亡率高達(dá)50%以上。新生兒阪崎腸桿菌感染與嬰兒配方奶粉密切相關(guān),奶粉中微量的阪崎腸桿菌污染也能導(dǎo)致感染的發(fā)生。
阪崎腸桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Enterobacter sakazaii test plate BQ208)是一種預(yù)先制備好的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由阪崎腸桿菌選擇性培養(yǎng)基、吸水凝膠和特異性酶顯色劑等組成,簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,更加適合各級(jí)檢驗(yàn)部門(mén)和食品生產(chǎn)企業(yè)使用。本產(chǎn)品適用于奶粉、牛奶及奶制品的快速檢測(cè)。
參照標(biāo)準(zhǔn):食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)阪崎腸桿菌檢驗(yàn)(GB/T4789.40-2008)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品100mL(g),加入已預(yù)熱至44℃裝有900mL專(zhuān)用增菌液的錐形瓶中,用手緩緩地?fù)u動(dòng)至充分溶解,36℃±1℃,增菌培養(yǎng)6-8h。
2.2、接種:將阪崎腸桿菌測(cè)試片(BQ208)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管吸取1mL經(jīng)過(guò)增菌的樣品液,慢慢均勻地滴加到中央濾紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)樣品接種兩片。做一片空白陰性對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為阪崎腸桿菌,為陽(yáng)性結(jié)果;無(wú)任何點(diǎn)為陰性結(jié)果。出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣本,最好用其他更為可靠的方法進(jìn)行驗(yàn)證,沒(méi)有條件的至少要再取樣重復(fù)檢驗(yàn)一次。
4、結(jié)果報(bào)告
在100mL(或100g )樣品中檢出或未檢出阪崎腸桿菌。
5、附加說(shuō)明
5.1 、經(jīng)過(guò)試驗(yàn),測(cè)試片具有很好的特異性,接種阪崎腸桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),接種一些腸道菌如大腸桿菌、腸炎沙門(mén)氏菌等時(shí),一加樣下去就會(huì)出現(xiàn)有紫色的點(diǎn)或暈狀,此為產(chǎn)品本身顯色劑的原因,不影響產(chǎn)品的使用和結(jié)果判讀;而金黃色葡萄球菌、大腸桿菌O157和副溶血弧菌等均被抑制。
5.2 、多次試驗(yàn)結(jié)果阪崎腸桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為4cfu/mL,與平皿法的符合率均在80%以上。
5.3 、專(zhuān)用增菌液的配制和滅菌:取一包專(zhuān)用增菌培養(yǎng)基粉,倒入1000mL的三角錐瓶中,加入900mL純凈水,加塞后加熱至沸,保持20分鐘,冷卻后當(dāng)天使用。有條件可采用高壓滅菌。
5.4 、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
十五、蠟樣芽胞桿菌測(cè)試片使用說(shuō)明
1、原理及適用范圍
蠟樣芽孢桿菌(Bacillus cereus)在自然界分布廣泛,在各種食品中的檢出率也較高,往往是食品在食用前保存溫度不當(dāng),放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng),使污染在食品中的蠟樣芽孢桿菌或殘存的芽孢得以生長(zhǎng)繁殖,或是由于含有蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生的熱穩(wěn)定毒素,而導(dǎo)致食物中毒的發(fā)生。中毒的發(fā)病率較高,一般為60%~100%。
蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(FilmplateTM Bacillus cereus test plate BL210)是一種商品化的一次性培養(yǎng)基產(chǎn)品,由選擇性培養(yǎng)基、高分子吸水凝膠和專(zhuān)一性酶指示劑等構(gòu)成,一步培養(yǎng)顯色就可確認(rèn)是否有病原菌的存在,大大地簡(jiǎn)化了檢測(cè)程序,對(duì)于提高細(xì)菌性食物中毒突發(fā)事件的反應(yīng)能力具有重要的作用,同時(shí)也可在食品生產(chǎn)企業(yè)使用。
本產(chǎn)品適用于乳制品、肉類(lèi)、淀粉類(lèi)食品、各種甜點(diǎn)等的快速檢測(cè)。
2、操作方法
2.1、樣品處理:取樣品25mL(g)放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液(或生理鹽水)的取樣罐或均質(zhì)杯內(nèi),制成1:10的樣品勻液。用1mL滅菌吸管吸取1:10樣品勻液1mL,注入含有9mL稀釋液的試管內(nèi),振搖后成為1:100的樣品勻液。
2.2、接種:將蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片(BL210)置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,揭開(kāi)上層膜,用無(wú)菌吸管每個(gè)梯度各取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上,然后再將上層膜緩慢蓋下,靜置10s左右,使培養(yǎng)基凝固,每個(gè)稀釋度接種兩片,同時(shí)做一片空白對(duì)照。
2.3、培養(yǎng):將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,并封口,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過(guò)12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
3、結(jié)果判讀
對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察,呈藍(lán)綠色的菌落為蠟樣芽孢桿菌。對(duì)于出現(xiàn)陽(yáng)性菌落的樣品,最好用其他方法作進(jìn)一步的鑒定。
4、附加說(shuō)明
4.1、本產(chǎn)品具有很好的特異性,接種蠟樣芽孢桿菌純菌株產(chǎn)生典型的藍(lán)綠色點(diǎn),而大部分非目標(biāo)菌如大腸桿菌、大腸桿菌O157、沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌和阪崎腸桿菌等均被抑制。
4.2、初步試驗(yàn)表明,蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片對(duì)純菌的最低檢測(cè)限為1cfu/mL。用蠟樣芽孢桿菌測(cè)試片檢測(cè)了23種食品樣品,同時(shí)接種平皿做對(duì)比試驗(yàn)。測(cè)試片檢出陽(yáng)性樣品7個(gè),檢出率為30.4%;用平皿法檢出陽(yáng)性樣品6個(gè),檢出率為26.1%,測(cè)試片法比平皿法高了4.3%。
4.3、注意使用過(guò)的測(cè)試片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。
十六、致病菌增菌檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明
1、適用范圍
本品適用于食品及水中致病性沙門(mén)氏菌、金黃色葡萄球菌、副溶血弧菌、致瀉大腸埃希氏菌(含腸出血性大腸桿菌O157:H7)、蠟樣芽孢桿菌、阪崎腸桿菌檢測(cè)的前期增菌實(shí)驗(yàn)觀察以及大腸菌群污染程度的檢測(cè)。
2、方法原理
依據(jù)國(guó)標(biāo)GB/T4789.3.4.5.6.7.10.14-2003方法,采用包被技術(shù)將相對(duì)應(yīng)培養(yǎng)基包被在試劑盒底部,隨時(shí)取用。
3、樣品稀釋
同國(guó)標(biāo)法。液體樣品取原液。固體或半固體樣品用滅菌生理鹽水配制成1:10和1:100的稀釋液。
4、致病菌檢測(cè)
4.1、加樣:用滅菌吸管吸取原液或1:10樣品稀釋液4ml~10 ml(不得少于4ml)分別加入到標(biāo)號(hào)為1、2、3、A、B、C的增菌格(孔)內(nèi)。加樣后的1、2、3號(hào)分別為副溶血弧菌、致瀉大腸埃希菌、阪崎腸桿菌增菌液;A、B、C分別為金黃色葡萄球菌、沙門(mén)菌、蠟樣芽孢桿菌增菌液。
4.2、 培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)6~18小時(shí)。
4.3 、觀察結(jié)果:如果某致病菌的增菌液發(fā)生渾濁,即預(yù)示含有此種致病菌。條件具備的話,可按國(guó)標(biāo)法進(jìn)一步檢測(cè)。
5 、大腸菌檢測(cè)
5.1 、加樣:將試劑盒放在試驗(yàn)臺(tái)面上,打開(kāi)盒蓋,用滅菌吸管分別吸取3個(gè)原液或1:10樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為4、5、6的小培養(yǎng)基孔內(nèi)。另用滅菌吸管分別吸取3個(gè)1:10或1:100的樣品稀釋液1ml加到標(biāo)號(hào)為7、8、9的小培養(yǎng)基孔內(nèi),標(biāo)號(hào)為10的小培養(yǎng)基孔內(nèi)可加入1ml滅菌生理鹽水作為培養(yǎng)基陰性對(duì)照孔使用。
5.2 、排氣泡:加樣后集氣窗內(nèi)如有氣泡存在,可將試劑盒以30~45度角傾斜使氣泡排出,必要時(shí)可輕輕用力在桌面上敲擊數(shù)下排出氣泡。
5.3 、培養(yǎng):將加樣后的試劑盒蓋上蓋,平放在36℃±1℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18~24小時(shí)。
5.4 、觀察結(jié)果:樣液變?yōu)辄S色為產(chǎn)酸、集氣窗中有氣泡為產(chǎn)氣,產(chǎn)酸產(chǎn)氣者為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的孔數(shù)越多,說(shuō)明污染越嚴(yán)重。
6、注意事項(xiàng)
6.1、致病菌檢測(cè)與大腸菌檢測(cè)可同時(shí)進(jìn)行;加入樣品后不需搖勻;大腸菌檢測(cè)培養(yǎng)前一定要排氣泡,在培養(yǎng)箱中取試劑盒時(shí)注意平托出來(lái),避免由于試劑盒的傾斜使大腸菌陽(yáng)性集氣窗中的氣泡流失而影響結(jié)果判斷。
6.2、試劑盒為一次性無(wú)菌包裝用品,供一次性即開(kāi)即用,。
7、保存條件和有效期
避光保存于陰涼干燥處,最佳溫度為2~8℃,有效期18個(gè)月。
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便攜式恒溫培養(yǎng)箱
產(chǎn)品用途: 微生物、真菌毒素檢測(cè)時(shí)的恒溫培養(yǎng)使用
產(chǎn)品說(shuō)明
一、適用范圍 微生物、真菌毒素檢測(cè)時(shí)的恒溫培養(yǎng)使用。
二、儀器特點(diǎn) 小巧、耐用、便于攜帶。即可在實(shí)驗(yàn)室使用,又可采用車(chē)載電源轉(zhuǎn)換器在車(chē)中使用。
三、主要技術(shù)參數(shù)
工作室尺寸(mm):200×250×200
外形尺寸(mm):350×340×260
控溫范圍(℃):外界~45
電源電壓(V):220
功率(W):50
溫度波動(dòng)(℃):±1
四、使用方法
1、將需培養(yǎng)的物品放入箱內(nèi),關(guān)好箱門(mén)。
2、接通電源,打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),指示燈亮,表示工作正常,儀表顯示工作室溫度,然后將按碼開(kāi)關(guān)按到所需溫度(如37.0℃),綠燈亮表示通電升溫,紅燈亮表示斷電保溫,紅綠燈交替變化表示進(jìn)入恒溫狀態(tài),當(dāng)儀器恒溫30min后,儀表顯示溫度和設(shè)定基本一致。并可通過(guò)按碼進(jìn)行適當(dāng)調(diào)節(jié)。
五、注意事項(xiàng)
1、工作室內(nèi)物品擺放切勿過(guò)擠,以便于熱量循環(huán),使物品受熱均勻。
2、使用過(guò)程中,溫度變化出現(xiàn)異常,應(yīng)及時(shí)停機(jī)檢查。
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